一、细胞粘附分子与不孕症（论文文献综述）
徐鹏[1]（2021）在《隔药饼灸治疗内异症miRNAs及PI3K-Akt信号通路的理论和实验研究》文中研究指明目的:1、通过文献研究法,梳理古今医家和现代医学对内异症的研究,探究灸法治疗内异症的原理及作用规律。2、通过改良的自体移植法诱导建立内异症小鼠模型,在验证隔药饼灸对内异症痛经具有良好的镇痛作用、抑制异位内膜体积生长的基础上,探究隔药饼灸对内异症小鼠miRNA表达的影响,并进行PCR验证,检测其对PI3K/Akt信号通路表达的影响。3、综合文献和实验研究,通过对经络、腧穴、筋膜、miRNA、信号通路关系的研究,探讨隔药饼灸抗细胞粘附侵袭、抗细胞生长增殖和抗血管生成作用的经络机理,研究关元穴隔药饼灸治疗内异症具体的机制。方法:44只SCID实验小鼠,五只一笼,采用改良自体移植法,将一侧子宫裁剪成大小为5×5mm的片段,把子宫内侧面固定在另一侧的腹壁上,术后断食一天并连续肌注青霉素三天防止感染,七天后随机选取两只,开腹显示病灶处异位内膜体积增大,为直径5～8mm的半透明囊泡,内有液体积聚,有新生血管,表明造模成功。将造模成功的小鼠不区分体重大小等因素,随机分为模型组（A组）、西药组（B组）、隔药饼灸组（C组）,每组12只,按每笼4只饲养。各组自造模结束后第14天起给药,每天一次,连续两周。模型组用8号灌胃针进行等体积生理盐水灌胃。隔药饼灸组用附子、红花、当归等中药按比例打粉并与黄酒混合,用自制模具制作规格为10mm×10mm×4.5mm的药饼,用模具制作的艾炷于关元穴进行隔药饼灸,每只小鼠灸4壮。西药组用达那唑溶液按36mg/kg体质量进行灌胃。治疗期间记录隔药饼灸镇痛效果,治疗结束后测量各组异位内膜组织大小,提取各组小鼠的异位内膜组织并用保存并进行相关检测。高通量测序方法筛选EMs实验各组的异位内膜差异表达miRNAs,预测miRNA的下游靶基因,通过MAGIA2软件和Pearson相关系数将靶基因与miRNAs进行配对,采用qRT-PCR的方法对以上确定出的关键miRNAs和靶基因进行验证;对调控网络中基因差异表达进行分析,使用DAVID软件对筛选的miRNA进行功能分析,并应用超几何检验获得显着富集的GO条目和KEGG路径图谱;利用western blotting技术检测PI3K-Akt-mTOR信号通路及相关因子的表达。结果:1、隔药饼灸组发生扭体反应总次数呈下降趋势,有扭体反应的小鼠数量、扭体次数和扭体发生率均在降低,且数据具有统计学意义,表明隔药饼灸对小鼠痛经的镇痛效果明显。2、隔药饼灸组的平均生长抑制率为86.28%,优于西药组的78.65%,隔药饼灸的对异位内膜的生长抑制作用效果更明显。3、差异化表达的miRNA与模型组相比,隔药饼灸组筛选出4个下调miRNA:miR-6538,miR-3470a,miR-2137,miR-5126。与西药组相比,隔药饼灸组筛选出9个下调miRNA:miR-499-5p,miR-133b-3p,miR-496a-3p,miR-206-3p,miR-21a-5p,miR-3473b,miR-493-5p,miR-133a-3p,miR-487b-3p。筛选出4个上调miRNA:miR-183-5p,miR-205-5p,miR-181a-2-3p,miR-200c-3p。与模型组相比,西药组筛选出10个下调miRNA:miR-21a-5p,miR-3473b,miR-483-3p,miR-6240,miR-3963,miR-3970,miR-15a-5p,let-7i-5p,miR-2137,miR-5126。筛选出7个上调miRNA:miR-195a-3p,miR-615-3p,miR-708-3p,miR-296-3p,miR-671-3p,miR-298-5p,miR-181a-2-3p。4、PCR验证miRNA通过各组共同调控的miRNA,筛选出miR-2137、miR-5126、miR-3963、miR-6240、miR-1981-5p、miR-708-3p、miR-3473b、miR-206-3p、miR-21a-5p、miR-181a-2-3p这十个miRNA,经过实时荧光定量检测,筛选出miR-708-3P、miR-5126-3P、miR-1981-5P、miR-206-3p这4个miRNA,最终确定miR-708-3P、miR-5126-3P这两个miRNA符合条件。5、PCR验证mRNA对PCR筛选出的miR-708-3P、miR-5126-3P各自调控的mRNA有Igf1r、Mapk1、VEGF、Ppp2r5c、Magi2、Wnt7a、Nprl3、Rps6ka2、Igf1、Sos1进行实时荧光定量检测,结合miRNA与mRNA的负调控关系,筛选出Vegf、Ppp2r5c、Wnt7a、Rps6ka2这四个靶基因。6、Western Blot检测PI3K-Akt-mTOR蛋白WB检测各组相应的PI3K、Akt、mTOR三种蛋白的表达含量,与模型组相比,隔药饼灸组的三种蛋白表达含量均下降且具有统计学意义,而西药组虽然三种蛋白表达含量亦下降,但PI3K蛋白的降低量未达统计学意义,Akt、mTOR的下降具有统计学意义。结论:1、隔药饼灸对内异症小鼠具有显着的镇痛作用和抑制异位内膜组织生长得作用。2、隔药饼灸可以调控内异症小鼠的miRNA和相应的靶基因,调控PI3K/Akt/mTOR信号通路,进而抗细胞粘附侵袭、抗细胞生长增殖和抗血管生成,对异位内膜组织起到治疗作用。3、对关元穴隔药饼灸可以调控筋膜上的miRNA、靶基因PI3K/Akt/mTOR信号通路,调整三焦焦膜的理化特性,进而调整冲任二脉的经气,治疗子宫内膜异位症。
顾路路[2]（2021）在《人类疱疹病毒6型与女性不孕症的相关性研究》文中研究说明目的:人类疱疹病毒6型（Human Herpes Virus-6,HHV-6）是一种较为常见的病毒,可以在人类生殖道中感染和复制,为了研究HHV-6与女性不孕症之间的相关性,从而为女性不孕症的治疗提供新的方法和思路。方法:随机选择2019年11月-2020年12月在吉林大学第二医院门诊及住院部收治的不孕症患者75例为实验组,同期随机选择10例健康已婚已育女性作为对照组。于宫腔镜术中取患者的子宫内膜组织,提取并纯化子宫内膜样本中的RNA,逆转录为c DNA后,应用实时荧光定量PCR检测实验组和对照组患者子宫内膜组织中HHV-6 U94及HHV-6U42的表达情况及相对表达量。应用SPSS 25.0统计学软件进行分析,采用连续校正法,P<0.05表示两组之间的差异具有统计学意义。结果:1.实验组的年龄在32.73±3.81岁,患者的经期持续时间为5.13±1.11天,月经周期为30.28±3.25天,样本采集时间为月经第12.20±1.05天。对照组的年龄在34.1±3.07岁,患者的经期持续时间为5.10±0.99天,月经周期为29.0±1.45天,样本采集时间为月经第12.30±0.95天。两组患者的年龄、经期持续时间、月经周期、样本收集时间之间差异无统计学意义（P>0.05）;2.实验组子宫内膜中59例检测出HHV-6 U94的表达,表达率为78.7%,对照组子宫内膜组织中5例检测出HHV-6 U94,表达率为50%,低于实验组表达率,差异不具有统计学意义（P>0.05）。但实验组子宫内膜HHV-6 U94相对表达量为26.82±18.74,对照组子宫内膜HHV-6 U94相对表达量为1.00±0.25,两组相对表达量之间差异有统计学意义（P<0.05）。3.实验组子宫内膜中48例检测出HHV-6 U42的表达,表达率为64%,对照组子宫内膜组织中4例检测出HHV-6 U42,表达率为40%,低于实验组表达率,差异不具有统计学意义（P>0.05）。但实验组子宫内膜HHV-6 U42相对表达量为20.43±17.31,对照组子宫内膜HHV-6 U42相对表达量为1.00±0.42,两组相对表达量之间差异有统计学意义（P<0.05）。4.病毒表达定义为潜伏感染（单独表达U94）和持续性感染（表达U94和U42）两种形式。实验组子宫内膜中48例（64%）检测持续性感染,对照组子宫内膜中4例（40%）检测出持续性感染,实验组高于对照组,但差异不具有统计学意义（P>0.05）。实验组子宫内膜中11例（14.7%）检测潜伏感染,对照组子宫内膜中1例（10%）检测出潜伏感染,实验组高于对照组,差异不具有统计学意义（P>0.05）。结论:1.HHV-6在子宫内膜中具有较高的感染率。2.HHV-6在子宫内膜中的表达量与女性不孕症具有相关性,但HHV-6导致女性不孕症的具体机制需要进一步大样本研究。
于海帆[3]（2021）在《YAP/TAZ在小鼠子宫蜕膜化过程中的作用及调节机制》文中研究表明蜕膜化是子宫基质细胞增殖并分化为蜕膜细胞的过程,是子宫对正在发生着床的胚胎的响应,也是胚胎发育和成功妊娠的关键过程。蜕膜化缺陷可能导致一系列妊娠疾病,包括反复自然流产和早期妊娠失败。尽管许多转录因子、细胞因子和信号通路已被证实参与胚胎着床和蜕膜化过程,但其潜在的调控机制目前尚不完全清楚。大量研究表明,Yes-相关蛋白（YAP）和具有PDZ结合基序的转录共激活因子（TAZ）参与调控器官大小、干细胞功能、器官再生和肿瘤发展等过程。基因敲除鼠相关研究已证实,YAP/TAZ在哺乳动物胚胎发育过程中发挥重要作用。YAP缺失的胚胎具有致死性,而TAZ缺失的小鼠能够存活,但表现出肾脏发育缺陷。然而,关于YAP/TAZ在子宫蜕膜化过程中的作用及调控机制的研究很少。本课题旨在研究YAP/TAZ在小鼠子宫蜕膜化过程中的作用及调节机理,为进一步明确哺乳动物胚胎着床及蜕膜化的机制提供依据。在本研究中我们观察到,在小鼠子宫蜕膜化过程中YAP的表达量逐渐升高,并且证实YAP失活会影响子宫基质细胞的增殖和分化,并伴有细胞周期的阻滞。在子宫基质细胞中,Bmp2可通过Bmp I型受体Alk2促进YAP的表达并诱导YAP的核积累,从而增强细胞核内YAP-TEAD转录活性。通过si RNA或添加抑制剂导致YAP失活后可阻碍Bmp2对基质细胞分化的促进作用。使用荧光素酶报告基因分析发现,迁移到细胞核中的YAP可直接结合到Rrm2启动子区域的TEAD序列,并调节Rrm2在基质细胞中的功能。通过检测8-OHd G含量发现,过表达Rrm2可改善YAP失活引起的基质细胞DNA损伤,同时恢复基质细胞分化。进一步分析发现,YAP介导Bmp2对Rrm2表达的调控,而添加Rrm2抑制剂Triapine处理会阻碍Bmp2对基质细胞分化的诱导作用。YAP抑制后显着下调了GR和GPX的活性,进一步导致GSH含量下降,但上述指标在Rrm2过表达组呈现出相反的趋势。通过检测基质细胞内ROS含量、ATP水平、线粒体DNA拷贝数、线粒体膜电位以及线粒体膜通透性转运孔的开放程度,我们发现YAP失活会引起基质细胞发生氧化应激,并进一步导致线粒体功能发生紊乱。同时,YAP的失活通过促进Caspase-3和Bax的表达并抑制Bcl-2的表达从而诱发基质细胞凋亡。然而,GSH可有效的清除升高的ROS水平,并防止YAP失活引起的氧化应激、线粒体功能发生紊乱和细胞凋亡。本研究结果表明,TAZ定位于蜕膜组织中,能够通过靶向Ccnd3和Cdk4以加速细胞周期G1/S的过渡从而促进基质细胞的增殖,同时TAZ可促进基质细胞分化的标志分子Prl8a2和Prl3c1的表达,提高ALP的活性,表明TAZ对蜕膜化的发生至关重要。沉默TAZ会阻碍HB-EGF诱导的基质细胞的增殖和分化。在氧化应激状态下,TAZ通过减少细胞内ROS水平,并通过依赖于Nrf2/ARE/Foxo1的信号通路来增强基质细胞的抗氧化能力,进而保护基质细胞分化免受氧化损伤。TAZ能够增强Nrf2的转录活性,而Nrf2可直接与Foxo1启动子区域的抗氧化反应元件（ARE）结合。此外,TAZ沉默后可导致NOX活性升高从而引起细胞内ROS的积累,而一旦NOX的活性被APO抑制后,基质细胞分化所受的损伤可明显获得挽救。进一步研究表明,ATP水平升高、mt DNA拷贝数增加、线粒体膜电位升高和线粒体超氧化物水平下降共同提示,TAZ可明显恢复基质细胞的线粒体功能。同时,TAZ能够调节线粒体呼吸链复合物I和III的活性,而通过ROT和AA分别抑制其活性后,均可导致TAZ对基质细胞分化的保护作用丧失。另外,在氧化应激过程中,TAZ还可通过上调Bcl-2的表达并抑制Caspase-3的活性及Bax的表达来防止基质细胞发生凋亡。综上所述,本研究表明,YAP/TAZ在小鼠蜕膜化过程中发挥重要作用。我们的结果证实YAP可作为Bmp2的下游调控蛋白,通过TEAD/Rrm2/GSH/ROS信号通路调节子宫蜕膜化过程。TAZ可能通过靶向Ccnd3介导HB-EGF在子宫蜕膜化中的作用,并通过Nrf2/ARE/Foxo1信号通路减轻氧化应激介导的基质细胞分化损伤。
吴洋[4]（2021）在《多囊卵巢综合征对于围着床期子宫中免疫细胞及细胞外基质的影响》文中研究说明2018年“多囊卵巢综合征国际循证医学指南”中报道8%-13%的女性患有多囊卵巢综合征（Polycystic Ovary Syndrome,PCOS）,其中80%以上育龄期PCOS患者饱受不孕症的困扰。正常妊娠需要具备着床能力的胚胎与处于容受性的子宫内膜相互作用,两者缺一不可。即使PCOS患者通过辅助生殖技术移植了高质量的胚胎,子宫内膜的异常仍然会导致着床失败或不良的妊娠结局。目前,对于PCOS子宫内膜异常的研究相对不足,其导致着床失败的确切机制也仍未阐明。对于围着床期PCOS子宫内膜变化的机制研究,可以帮助我们寻找潜在的治疗靶点、进一步提升胚胎种植成功率并改善妊娠丢失。本课题从小鼠PCOS模型、脱氢表雄酮短期干预等小鼠处理,以及人PCOS内膜标本补充研究三个层次,对围着床期PCOS子宫内膜容受性的改变进行了分析探究。本论文利用脱氢表雄酮（Dehydroepiandrosterone,DHEA）处理小鼠建立PCOS模型,这些小鼠成功地表现出卵巢多囊样改变、高雄激素血症、体重增加、不孕等PCOS特征。对PCOS小鼠妊娠第4天的子宫进行转录组测序显示,差异2倍以上的基因中有610个上调,91个下调。生物信息学分析显示:在细胞组分和分子功能方面,差异基因富集最多的是细胞外基质和多种与之相关的功能,如细胞粘附分子、基膜、细胞桥粒、细胞顶端质膜、微绒毛等;生物过程的富集分析显示,免疫反应相关生物学过程占比最高,包括细菌免疫反应和防御反应等。为进一步明确DHEA对小鼠子宫细胞外基质和免疫细胞的影响,本研究使用DHEA对小鼠进行了不同的处理:妊娠第3天DHEA处理小鼠1天,妊娠第1-3天DHEA处理正常妊娠小鼠3天,同样的方法处理假孕小鼠3天,卵巢切除后给予小鼠21天DHEA处理。基于上述预测分析以及DHEA不同处理,我们对小鼠子宫中的免疫细胞数量及定位进行了详细研究。（1）与对照组相比,PCOS小鼠围着床期子宫中性粒细胞增多并向腔上皮附近聚集,差异极为显着;妊娠第1-3天给予DHEA处理后,子宫中性粒细胞数量显着增多,同时向宫腔附近聚集,假孕小鼠同样给予3天DHEA处理后,中性粒细胞数量增多,但定位没有变化。（2）围着床期PCOS小鼠子宫中巨噬细胞显着增多并在子宫腔附近聚集,DHEA处理3天对巨噬细胞的数量和分布影响不大,但长期DHEA暴露可以增加内膜中的巨噬细胞数量,并促使其向宫腔附近聚集,围着床期胚胎对子宫中巨噬细胞的影响不大。（3）妊娠第4天PCOS小鼠子宫内膜基质中树突状细胞减少,肌层中树突状细胞数量无明显变化;围着床期使用DHEA分别处理正常妊娠小鼠和假孕小鼠3天,正常妊娠小鼠子宫中树突状细胞无明显改变,假孕小鼠子宫基质中树突状细胞数量大幅增加;卵巢切除小鼠DHEA处理21天后树突状细胞在子宫基质和肌层中的数量均显着增加。（4）与对照组相比,PCOS小鼠围着床期子宫肌层中肥大细胞增多,DHEA处理对子宫中肥大细胞数量影响不大。（5）围着床期PCOS小鼠子宫中B细胞显着增多,并向宫腔上皮附近聚集;DHEA处理3天可促使B细胞增多并向宫腔上皮聚集,宫腔中胚胎对B细胞的分布影响不大。此外,我们详细分析了DHEA对围着床期子宫细胞间连接和细胞外基质的影响。（1）与对照组相比,PCOS小鼠围着床期子宫中埃兹蛋白（Ezrin）在子宫腔上皮和腺上皮中表达明显增加,围着床期DHEA处理1天或3天都可以显着增加Ezrin在小鼠子宫上皮中的表达,并且影响其分布模式,胚胎对子宫中Ezrin表达的影响不明显。在人胚胎种植窗口期,PCOS患者子宫内膜腔上皮和腺上皮Ezrin表达均强于对照组,差异显着。（2）PCOS小鼠围着床期子宫腔上皮和腺上皮中钙粘蛋白的表达显着增加;DHEA处理3天对正常妊娠小鼠子宫中钙粘蛋白的表达影响不大,但假孕小鼠DHEA处理3天后子宫腔上皮和腺上皮钙粘蛋白的表达均增强。在人胚胎种植窗口期,PCOS患者子宫内膜腔上皮钙黏蛋白的表达明显强于对照组,腺上皮钙黏蛋白的表达无明显差异。（3）与对照组相比,PCOS围着床期子宫肌层中层粘连蛋白的表达显着增加,腔上皮基膜、腺上皮基膜和血管基膜中层粘连蛋白的沉积变薄,由正常的锯齿状变为细线状;围着床期DHEA处理3天可改变上皮基膜和血管基膜中层粘连蛋白沉积的形态,但对其厚度影响不大,同时子宫肌层中层粘连蛋白的表达显着增强,胚胎对围着床期子宫中层粘连蛋白的改变无明显影响。（4）围着床期PCOS小鼠子宫基质中层粘连蛋白γ1的表达随基质中血管数目的减少而下降,DHEA处理3天显着降低腺上皮基膜层粘连蛋白γ1的表达。在人胚胎种植窗口期,PCOS患者子宫内膜腔上皮和腺上皮层粘连蛋白γ1的表达无明显差异。（5）与对照组相比,围着床期PCOS小鼠子宫中胶原蛋白IV在腔上皮基膜或腺上皮基膜中的沉积变薄,并且随着子宫基质中血管的减少,胶原蛋白IV的表达显着减少;DHEA处理3天可产生与PCOS相似的变化。（6）CD31主要表达于血管内皮细胞质中,妊娠第4天小鼠子宫中CD31表达较为密集,但PCOS小鼠子宫中表达减少,差异极为显着;PCOS小鼠子宫中CD31显示切面呈圆环状的血管,其密度明显下降,更多的是切面管腔呈狭长状的血管,数量也较少;围着床期DHEA处理3天后子宫中血管显着减少;胚胎可能对围着床期小鼠子宫中血管的数量有影响。（7）妊娠第4天PCOS小鼠子宫腔上皮中荆豆凝集素（Ulex Europaeus Agglutinin,UEA）受体的表达强于对照组,腺上皮中UEA受体的表达无显着差异;围着床期DHEA处理小鼠1天,子宫腔上皮UEA受体于宫腔游离面顶端及邻近的细胞质中呈强表达;DHEA处理3天腔上皮UEA受体表达减少呈不均匀分布;卵巢切除后,子宫腔上皮和腺上皮中未见UEA受体的表达;围着床期子宫腔中的胚胎可能会诱导子宫上皮中UEA受体的表达增加。总之,PCOS小鼠与对照组小鼠妊娠第4天的子宫在m RNA层面存在显着差异,主要变化集中在免疫反应和细胞外基质等方面;DHEA对围着床期子宫中免疫细胞的数量和分布有较大影响,如中性粒细胞、巨噬细胞、树突状细胞、B细胞和肥大细胞等,这可能对其发挥正常的免疫作用有不良影响;细胞外基质是细胞通讯和细胞骨架的重要组分,DHEA对埃兹蛋白和钙黏蛋白的表达量都有较大改变,可能影响细胞的正常粘附和极性;DHEA对层粘连蛋白及其亚型、胶原蛋白IV以及CD31的影响,可能导致胚胎着床中细胞骨架的重构及细胞间沟通的异常。
周小叶[5]（2020）在《子宫内膜异位症及其腹腔镜手术治疗与不良妊娠结局情况的相关性分析》文中指出目的:探讨子宫内膜异位症（内异症,EMs）及其腹腔镜手术治疗对妊娠结局的影响。方法:回顾性分析2012年9月至2018年4月在我院经腹腔镜手术或组织学上确诊子宫内膜异位症且完成分娩的156名患者与同时间段于我院分娩的415名非内异症妊娠妇女的妊娠结局。根据是否合并内异症分为内异症组与非内异症组,内异症组内再根据妊娠前是否经过腹腔镜手术治疗分为妊娠合并内异症组与内异症术后再妊娠组,然后两组再根据术中子宫内膜异位症r-AFS分期情况分别分为Ⅰ/Ⅱ期组和Ⅲ/Ⅳ期组。内异症术后再妊娠组又再根据术中的子宫内膜异位症r-AFS分期及子宫内膜异位症病理分型的情况分别分为亚组Ⅰ/Ⅱ期组和Ⅲ/Ⅳ期组及单纯卵巢型组,单纯腹膜型组及卵巢型合并腹膜型组进行比较。比较分析各组间分娩方式、受孕方式、妊娠早期黄体酮治疗情况、妊娠晚期发生不良妊娠结局情况及各具体不良妊娠结局（胎儿窘迫、羊水量异常、胎位异常、妊娠期糖尿病、前置胎盘、早产、胎膜早破、胎盘早剥、胎盘植入、妊娠期高血压、巨大胎儿、胎儿生长受限、产程异常、产后出血）的差异并进行单因素和多因素统计分析腹腔镜手术治疗子宫内膜异位症后自然妊娠出现不良妊娠结局的可能危险因素。结果:内异症组中人工辅助生殖技术（ART）、剖宫产（CS）、妊娠早期黄体酮治疗、妊娠晚期存在不良妊娠结局、胎儿宫内窘迫、胎位异常、前置胎盘的发生率均显着高于非内异症组,差异具有统计学意义（x2值分别为36.367、70.602、111.212、13.510、4.981、31.664、16.609,均P<0.05）,两组羊水量异常、妊娠期糖尿病、早产、胎膜早破、胎盘早剥、胎盘植入、妊娠期高血压、巨大胎儿、胎儿宫内生长受限（FGR）、产程异常、产后出血的发生率差异均无统计学意义（x2值分别为0.026、0.949、0.345、0.675、0.018、2.128、0.098、0.506、0.001、0.117、1.954,均P>0.05）,排除ART患者后内异症组中的剖宫产（CS）、妊娠早期黄体酮治疗、妊娠晚期存在不良妊娠结局、胎儿宫内窘迫、胎位异常、前置胎盘的发生率仍均显着高于非内异组,差异具有统计学意义（x2值分别为70.131、78.344、12.980、4.666、26.174、10.161,均P<0.05）。妊娠合并内异症组中的剖宫产（CS）发生率显着高于内异症术后再妊娠组（x2值为22.793,P<0.01）,排除ART与既往子宫手术史对妊娠结局的干扰后,妊娠合并内异症组中的剖宫产（CS）发生率仍显着高于内异症术后再妊娠组（x2值分别为23.468、21.904,P<0.01）;而妊娠合并内异症组中ART的发生率显着低于内异症术后再妊娠组（x2值为7.160,P<0.01）,排除既往子宫手术史对妊娠结局的干扰后差异仍显着存在（x2值为5.675,P<0.05）,差异具有统计学意义。无论在r-AFS分期Ⅰ/Ⅱ期组还是在r-AFS分期Ⅲ/Ⅳ期组中,妊娠合并内异症组中的剖宫产（CS）发生率均显着高于内异症术后再妊娠组（x2值分别为9.311、6.990,P<0.01）;r-AFS分期Ⅰ/Ⅱ期的妊娠合并内异症组ART的发生率显着低于内异症术后再妊娠组（x2值为7.552,P<0.01）,差异具有统计学意义;而r-AFS分期Ⅲ/Ⅳ期的妊娠合并内异症组和内异症术后再妊娠组的ART发生率差异无统计学意义（x2值为0.418,P>0.05）。内异症术后再妊娠组中r-AFS分期Ⅰ/Ⅱ期的妊娠妇女和r-AFS分期Ⅲ/Ⅳ期的妊娠妇女在合并不孕症,腹腔镜手术治疗与术后妊娠的间隔时间、受孕方式,分娩方式,妊娠早期黄体酮治疗情况及妊娠晚期存在不良妊娠结局、胎儿宫内窘迫、羊水量异常、胎位异常、妊娠期糖尿病、前置胎盘、早产、胎膜早破、胎盘早剥、胎盘植入、妊娠期高血压、巨大胎儿、胎儿宫内生长受限（FGR）、产程异常、产后出血的发生率差异均无统计学意义（P>0.05）。内异症术后再妊娠组中子宫内膜异位症病理分型为单纯腹膜型及卵巢合并腹膜型的患者合并不孕症的发生率均显着高于单纯卵巢型的患者（x2值分别为14.228、13.600,P<0.01）,差异具有统计学意义,而单纯腹膜型与卵巢合并腹膜型的患者合并不孕症的发生率差异无统计学意义（x2值为1.833,P>0.05）。卵巢合并腹膜型r-AFS分期Ⅲ/Ⅳ期的发生率明显高于单纯卵巢型和单纯腹膜型,单纯卵巢型r-AFS分期Ⅲ/Ⅳ期的发生率明显高于腹膜型（x2值分别为6.746、31.534、12.233,P<0.01）,差异具有统计学意义。卵巢合并腹膜型的手术治疗与术后妊娠间隔时间显着长于单纯卵巢型,差异有统计学意义（P<0.01）,卵巢合并腹膜型与单纯腹膜型,单纯卵巢型与单纯腹膜型之间的手术治疗与术后妊娠间隔时间的分布差异无统计学意义（P>0.05）;而其在受孕方式、分娩方式、妊娠早期黄体酮治疗、妊娠晚期存在不良妊娠结局、胎儿宫内窘迫、羊水量异常、胎位异常、妊娠期糖尿病、前置胎盘、早产、胎膜早破、胎盘早剥、胎盘植入、妊娠期高血压、巨大胎儿、胎儿宫内生长受限（FGR）、产程异常、产后出血的发生率差异也均无统计学意义（P>0.05）。合并不孕症、子宫内膜异位症r-AFS分期、子宫内膜异位症病理分型、卵巢囊肿单/双侧分布、卵巢直径≥5cm、腹腔镜手术治疗与术后妊娠的间隔时间与腹腔镜手术治疗子宫内膜异位症之后的自然妊娠在妊娠晚期出现不良妊娠结局均无明显相关（P>0.05）。结论:子宫内膜异位症的妊娠妇女无论是否通过ART获得妊娠,其发生不良妊娠结局的风险均增加,且经过腹腔镜手术治疗并不能改善不良妊娠结局的发生。子宫内膜异位症的r-AFS分期和病理分型均与手术治疗后妊娠的受孕方式、分娩方式及妊娠晚期不良妊娠结局的发生无明显相关,但卵巢合并腹膜型的患者术前合并不孕症的风险及术后腹腔镜手术治疗与妊娠的间隔时间均显着高于单纯卵巢型的患者。临床医生应加强对有生育要求的子宫内膜异位症的手术治疗管理及此类患者的产科管理和心理疏导。
陈勇[6]（2020）在《基于血清外泌体蛋白组联合复杂网络分析的针刺潜在治疗病谱及针刺网络调节作用规律的研究》文中研究指明目的:探索针刺潜在的治疗病谱及针刺的网络调节作用规律,为针刺更好地应用于临床提供科学依据。方法:将10只Wistar大鼠右后足跖处注射弗氏佐剂0.1 ml,制备佐剂性关节炎疾病模型。采用随机数字法将造模成功的10只大鼠随机分为模型组和模型+电针组,每组5只。同样的方法将其余12只大鼠随机分为空白对照组和正常+电针组,每组6只。模型电针组和正常电针组大鼠予足三里穴、环跳穴电针刺激,刺激参数为:疏密波,频率2/10Hz,强度5/10/15（0.76/1.53/2.3m A）,各10min,共30min,隔日一次,第27天后各组大鼠取腹主动脉血,并离心提取血清。Exo Quick法提取血清外泌体,通过透射电镜、蛋白质免疫印迹法（Western Blotting）、浓度粒径检测（NTA）等方法鉴定外泌体,应用非靶标（Label Free）定量蛋白组学技术测量血清外泌体所运载蛋白的种类和含量。筛选组间变化倍数大于1.5,p<0.05的针刺显着差异蛋白,将筛选出的263个正常针刺显着差异蛋白和61个炎症模型针刺显着差异蛋白作为源数据,在人类疾病数据库（MALACARD）查找与显着差异蛋白相关的疾病,通过Gephi软件构建正常针刺显着差异蛋白-疾病网和模型针刺显着差异蛋白-疾病网,将正常针刺显着差异蛋白相关疾病与模型针刺显着差异蛋白相关疾病列入Excel表格中,通过“突出显示单元格规则”下拉菜单中的“重复值”,找出正常针刺显着差异蛋白和模型针刺显着差异蛋白二者皆相关的疾病,并联合应用连入度（Degree）、加权入度（Weight Degree）、Page Rank等运行算法筛选与显着差异蛋白相关度高的疾病,剔除世界卫生组织（World Health Organization,WHO）、美国国立卫生研究院（National Institutes of Health,NIH）及国内《现代针灸病谱》已推荐的针灸治疗病症,最终确定针刺可能的潜在治疗病症。将实验一中筛选的61个炎症模型针刺显着差异蛋白作为源数据,在Uniprot蛋白数据库、STRING数据库、GO功能数据库、KEGG数据库中查找显着差异蛋白相关的互相作用蛋白、分子功能、信号通路及显着差异蛋白来源的细胞和组织,通过Gephi软件构建显着差异蛋白-互相作用蛋白网、显着差异蛋白-信号通路网、显着差异蛋白-功能网及显着差异蛋白-分泌细胞组织网,联合应用Degree、Weight Degree、Page Rank等运行算法筛选关键的互作蛋白、信号通路、分子功能、分泌细胞组织,探究针刺镇痛抗炎网络调节的作用规律。结果:1.实验结合复杂网络分析挖掘的针刺潜在治疗病症结果显示,针刺在32种肿瘤、15种免疫系统疾病、15种循环系统疾病、6种传染病、5种泌尿生殖系统疾病、4种代谢性疾病、4种骨骼肌肉系统和结缔组织疾病、3种消化系统疾病、2种呼吸系统疾病、2种皮肤疾病、2种神经系统疾病、1种五官疾病以及11种其他疾病中可能存在潜在的治疗效应。2.针刺显着差异蛋白的下游互作蛋白与免疫调节、脂质代谢、糖代谢、信号传导等功能密切相关;针刺显着差异蛋白的分子功能多与生物活性物质的合成代谢、免疫调节、信号传导以及生物活性物质的运输相关;Fox O、Ras、补体和凝血级联、HIF-1、糖酵解/糖异生、PPAR等信号通路可能是针刺整体调节的关键信号通路,这些通路多与免疫调节、糖代谢、脂质代谢等相关;针刺显着差异蛋白可来源于消化、泌尿生殖、呼吸、内分泌、循环、免疫、运动、神经、泌尿、皮肤等各个系统。结论:1.针刺潜在适应病症广泛,涉及多系统疾病,其中免疫系统疾病、肿瘤、代谢性疾病等可能是针刺重要的潜在治疗病症。2.针刺镇痛抗炎作用具有网络调节的特点,可从器官、组织、细胞、蛋白、信号通路等多层次、多维度、多途径发挥整体作用。
焦岩[7]（2020）在《多模态超声评估子宫内膜容受性在黄体功能不全所致复发性自然流产中的应用研究》文中进行了进一步梳理复发性自然流产（recurrent spontaneous abortion,RSA）是指与同一性伴侣连续发生3次及3次以上的自然流产。RSA病因复杂,常见的原因包括染色体异常、免疫功能异常、内分泌异常、黄体功能不全、自身免疫性疾病等,约30-40%的RSA原因不明。近年来,有关子宫内膜容受性（endometrial receptivity,ER）评价在RSA中的应用研究逐渐成为热点。大量研究认为,超声通过监测内膜厚度、内膜形态、内膜运动、内膜容积、内膜及内膜下血流分布等情况,可以用于评估ER,具有临床实用性,但各指标的单独应用存在一定的局限性。目前关于多模态超声评分评价RSA患者ER的研究并不多,且尚无公认的指南供临床医师参考。为此,本研究进行了尝试性研究,旨在探讨应用多模态超声评分评估黄体功能不全所致RSA患者ER的临床价值。本研究中,第一步,设立正常对照组和黄体功能不全所致RSA的病例组,每组均为100例,对全部受检者行子宫内膜容受性的多模态超声评估;第二步,对黄体功能不全所致RSA组100例受检者进行治疗,分为地屈孕酮片组50例,地屈孕酮片结合复方玄驹胶囊组50例,治疗一个周期后进行子宫内膜容受性的多模态超声评估。第三步,对黄体功能不全所致RSA组100例受检者随访妊娠结局。第四步,根据前三步研究结果,另外收集100例黄体功能不全所致RSA患者,均应用地屈孕酮片结合复方玄驹胶囊治疗,分为指导组和非指导组,每组各50例,随访妊娠结局。第一部分 多模态超声评估黄体功能不全所致复发性自然流产患者与正常人群子宫内膜容受性目的:探讨多模态超声评估黄体功能不全所致RSA患者与正常人群子宫内膜容受性可行性。方法:以黄体功能不全所致RSA患者与正常人群为研究对象,黄体功能不全所致RSA患者100例作为病例组,同时符合RSA和黄体功能不全的诊断标准;正常志愿者100例作为正常对照组,为同期已生育且无流产病史的育龄期妇女。收集两组受检者年龄、BMI等资料。检测两组受检者血清孕酮。超声检测子宫内膜厚度、形态类型、运动情况、血流情况、子宫内膜体积（Endometrial volume,EV）及血管血流指数（Vascularization-flow index,VFI）等参数,根据赋分标准进行多模态超声评分,评价ER。通过ROC曲线进一步分析子宫内膜厚度、EV、VFI及多模态超声评分等计量参数诊断黄体功能不全所致RSA的最佳截断值和约登指数。结果:两组的年龄、BMI差异无统计学意义（P>0.05）。病例组的孕酮水平低于正常对照组（P<0.05）。病例组子宫内膜厚度、EV和VFI均小于正常对照组（P<0.05）;病例组子宫内膜形态类型、运动情况和血流情况均差于正常对照组（P<0.05）。病例组子宫内膜多模态超声评分低于正常对照组（P<0.05）。通过ROC曲线分析有统计学意义的指标为子宫内膜厚度、EV、VFI及多模态超声评分,最佳截断值和约登指数分别为（8.71mm,0.49）、（4.00cm3,0.59）、（0.27mm,0.58）、（14.5,0.67）。子宫内膜多模态超声评分诊断黄体功能不全所致RSA的约登指数高于子宫内膜厚度、EV和VFI等指标。结论:黄体功能不全所致RSA患者子宫内膜多模态超声评分较正常者降低,多模态超声评分可较全面和客观反映子宫内膜情况,对黄体功能不全所致RSA患者ER进行有效评价。应用子宫内膜多模态超声评分诊断黄体功能不全所致RSA的准确度高于子宫内膜厚度、EV和VFI等指标。第二部分 多模态超声评估药物治疗对黄体功能不全所致复发性自然流产患者子宫内膜容受性的影响目的:探讨多模态超声评估药物治疗对黄体功能不全所致RSA患者子宫内膜容受性的影响。方法:以黄体功能不全所致RSA患者为研究对象,同时符合RSA和黄体功能不全的诊断标准,根据治疗方案不同分为两组,地屈孕酮片组50例,地屈孕酮片结合复方玄驹胶囊组50例。收集所有受检者年龄、BMI等资料。治疗前,检测两组受检者孕酮。超声检测子宫内膜厚度、形态类型、运动情况、血流情况,以及EV、VFI等参数,根据赋分标准进行评分评价ER。治疗一个周期后,再次进行上述检查,进行治疗前后的组间及组内对比分析。结果:两组间年龄、BMI等指标差异无统计学意义（P>0.05）。治疗前,两组间的孕酮、子宫内膜厚度、EV、VFI差异无统计学意义（P>0.05）;两组间的子宫内膜形态类型、运动情况和血流情况差异无统计学意义（P>0.05）;两组间的子宫内膜多模态超声评分差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后,两组的孕酮,治疗后均大于治疗前（P<0.05）,两组间差异无统计学意义（P>0.05）;两组的子宫内膜厚度、EV和VFI,治疗后均大于治疗前（P<0.05）,地屈孕酮片结合复方玄驹胶囊组大于地屈孕酮片组（P<0.05）;两组的子宫内膜形态类型、运动情况和血流,治疗后均优于治疗前,地屈孕酮片结合复方玄驹胶囊组优于地屈孕酮片组（P<0.05）;两组的子宫内膜多模态超声评分,治疗后均高于治疗前（P<0.05）,地屈孕酮片结合复方玄驹胶囊组大于地屈孕酮片组（P<0.05）。结论:多模态超声评分可以评价黄体功能不全所致复发性自然流产患者治疗前后子宫内膜容受性的差异,地屈孕酮片结合复方玄驹胶囊组对子宫内膜容受性的改善作用优于地屈孕酮片组。第三部分 药物治疗对黄体功能不全所致复发性自然流产患者妊娠结局的影响目的:探讨药物治疗对黄体功能不全所致RSA患者妊娠结局的影响。方法:以黄体功能不全所致复发性自然流产患者为研究对象,同时符合RSA和黄体功能不全的诊断标准,根据治疗方案不同分为两组,地屈孕酮片组50例,地屈孕酮片结合复方玄驹胶囊组50例。两组分别采用第二部分治疗方案继续治疗六个周期,并随访妊娠结局,对于妊娠者,药物应用至妊娠20周。再根据是否在治疗周期内妊娠并至正常分娩分为两组,收集两组受检者年龄、BMI等资料,对比妊娠至正常分娩组与未妊娠至正常分娩组,在第二部分研究中初次治疗一个周期后的孕酮、子宫内膜厚度、形态类型、运动情况、血流情况、EV、VFI及多模态超声评分的差异,并进一步通过ROC曲线分析子宫内膜厚度、EV、VFI及多模态超声评分的最佳截断值和约登指数。结果:地屈孕酮片组50例,治疗后妊娠31例,未妊娠19例,孕早期流产4例,妊娠至正常分娩27例;地屈孕酮片结合复方玄驹胶囊组50例,治疗后妊娠40例,未妊娠10例,孕早期流产2例,妊娠至正常分娩38例。地屈孕酮片组妊娠至正常分娩百分比为54%,地屈孕酮片结合复方玄驹胶囊组妊娠至正常分娩百分比为76%。地屈孕酮片结合复方玄驹胶囊组妊娠至正常分娩百分比明显高于地屈孕酮片组（P<0.05）。妊娠至正常分娩组与未妊娠至正常分娩组间比较分析,年龄、BMI等指标差异无统计学意义（P>0.05）;在第二部分研究中初次治疗一个周期后,孕酮和子宫内膜厚度两项指标差异无统计学意义（P>0.05）,子宫内膜形态类型、运动情况、血流情况,妊娠至正常分娩组优于未妊娠至正常分娩组（P<0.05）,EV、VFI及多模态超声评分,妊娠至正常分娩组大于未妊娠至正常分娩组（P<0.05）。通过ROC曲线分析有统计学意义的指标为EV和多模态超声评分,最佳截断值和约登指数分别为（4.333;0.393）、（12.5;0.687）。结论:经地屈孕酮片结合复方玄驹胶囊治疗黄体功能不全所致复发性自然流产患者的妊娠至正常分娩百分比高于单独应用地屈孕酮片,妊娠至正常分娩组与未妊娠至正常分娩组之间在药物初次治疗一个周期后的EV、VFI及多模态超声评分存在差异,多模态超声评分诊断准确度高于孕酮。第四部分 多模态超声评估子宫内膜容受性在黄体功能不全所致复发性自然流产患者药物治疗中的指导价值目的:探讨多模态超声评估子宫内膜容受性在黄体功能不全所致RSA患者药物治疗中的指导价值。方法:另选黄体功能不全所致复发性自然流产患者100例为研究对象,同时符合RSA和黄体功能不全的诊断标准,应用地屈孕酮片结合复方玄驹胶囊治疗,根据是否采用多模态超声评分指导受孕分为指导组和非指导组,每组各50例,指导组根据第三部分研究所得两组初次治疗一个周期后妊娠至正常分娩组与非妊娠至正常分娩组间的子宫内膜多模态超声评分的最佳截断值调整药物用量和指导受孕,非指导组不根据最佳截断值调整药物用量和指导受孕。连续治疗前检测两组受检者孕酮及子宫内膜多模态超声评分。指导组根据多模态超声评分决定后续治疗方案,超过最佳截断值者,维持药量指导受孕,低于最佳截断值者,调整药物剂量治疗一个周期后复查,并按新的方案连续治疗六个周期。如果在此过程中确认妊娠则停止检查,药物应用至妊娠20周,随访妊娠结局。结果:两组间年龄、BMI等指标差异无统计学意义（P>0.05）。第一个治疗周期前,两组间孕酮和多模态超声评分差异无统计学意义（P>0.05）;第一个治疗周期后,两组间的孕酮和多模态超声评分差异均无统计学意义（P>0.05）。两组孕酮和多模态超声评分在第一个治疗周期前、后比较差异均有统计学意义,治疗后大于治疗前（P<0.05）。指导组在第一个治疗周期后多模态超声评分低于12.5者,经过第二个治疗周期后,孕酮和多模态超声评分,第二个治疗周期后均大于第一个治疗周期后（P<0.05）指导组50例,治疗后妊娠46例,未妊娠4例,孕早期流产1例,妊娠至正常分娩45例;非指导组50例,治疗后妊娠40例,未妊娠10例,孕早期流产2例,妊娠至正常分娩38例。指导组妊娠至正常分娩百分比为90%,非指导组妊娠至正常分娩百分比为76%。指导组妊娠至正常分娩百分比明显高于非指导组。结论:在地屈孕酮片结合复方玄驹胶囊治疗黄体功能不全所致复发性自然流产患者过程中,相对于不指导的情况,根据多模态超声评分最佳截断值指导受孕可提高妊娠至正常分娩百分比。
黄愈[8]（2020）在《HCG用于人工周期冻融胚胎移植后黄体支持的前瞻性随机对照研究》文中认为研究背景:辅助生殖技术（Assisted reproductive technology,ART）是目前治疗不孕症最有效的方法。随着玻璃化冻融胚胎技术的成熟和临床上一些需要,如:预防卵巢过度刺激综合症（Ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS）、胚胎种植前遗传学检测（Preimplantation Genetic Testing,PGT）及生育力保存等,冻融胚胎移植（Frozen-thawed embryo transfer,FET）已经成为ART中重要的一部分。如何在FET周期使得子宫内膜与胚胎发育同步,从而提高胚胎种植率及临床妊娠率一直是生殖领域研究的热点。FET周期中,常用的子宫内膜准备方案有人工周期（Hormone replacement therapy,HRT）和自然周期（Natural cycle,NC）两种。HRT周期由于患者复诊次数少,易于掌控,是临床中常用的准备内膜方案。人绒毛膜促性腺激素（Human chorionic gonadotropin,HCG）由于其特殊的分子结构,不仅可以起到黄体支持的作用,并且在胚胎侵袭蜕膜过程中及母胎界面的免疫调节中均起着重要的作用。既往关于在人工周期冻融胚胎移植（Hormone replacement therapy-Frozen embryo transfer,HRT-FET）后添加HCG的有效性结论不一。本课题拟对HCG是否可以改善HRT-FET周期的妊娠结局做一前瞻性随机对照研究。研究目的:HRT-FET周期添加HCG进行黄体支持是否可改善妊娠结局。设计:前瞻性随机对照研究。研究方法:将2018年11月1日至2019年10月31日在西北妇女儿童医院生殖中心行FET的患者纳入研究。纳入标准:1.年龄<40岁;2.第一周期FET;3.HRT准备内膜（包括Gn RH-a+HRT周期）。排除标准:1.子宫内膜异位症;2.子宫畸形;3.转化日子宫内膜厚度<8mm;4.纳入其他研究的患者。所有入组患者均在转化内膜日根据电脑产生的随机数字分入研究组（A组）和对照组（B组）,并签署知情同意书。B组自胚胎移植日起给予常规黄体支持治疗;A组的黄体支持方案是在黄体酮内膜转化日的第3天开始,给予HCG 2000IU肌肉注射,隔日一次,连续4次,其它用药同B组。统计分析两组患者的临床基本资料、实验室相关数据以及FET周期妊娠结局。结果:本研究共纳入300例患者,其中完成胚胎复苏移植及随访的患者A组中有124例,B组中有121例。1.基线资料:A组与B组在年龄、不孕年限、不孕类型、不孕因素、AFC、BMI、b FSH两组间均无统计学差异（P>0.05）。2.超促排卵及实验室情况:两组超促排卵方案、受精方式、HCG日雌激素水平、获卵数、囊胚形成率、可用胚胎率及优胚率相比均无明显差异（P>0.05）。3.FET周期妊娠结局:在FET周期中,应用单纯HRT周期准备内膜患者明显多于Gn RH-a+HRT周期。A组移植年龄及平均移植胚胎数明显多于B组,两组间存在统计学差异（P<0.05）,A组移植D5囊胚期胚胎比例低于B组（77.42%vs 88.43%,P<0.05）两组间存在统计学差异,A组胚胎种植率低于B组（58.97%vs 70.07%,P>0.05）,两组间无统计学差异,A组临床妊娠率低于B组（66.94%vs 74.38%,P>0.05）,自然流产率低于B组（8.43%vs 8.89%,P>0.05）,两组间无统计学差异。4.移植D3卵裂期胚胎组FET妊娠结局:A组平均移植胚胎数多于B组,但A组胚胎种植率（39.13%vs 55.00%,P>0.05）及临床妊娠率均低于B组（57.14%vs71.43%,P>0.05）,两组间无统计学差异,A组流产率高于B组（18.75%vs 10.00%,P>0.05）,两组间无统计学差异。5.移植D5囊胚期胚胎组FET妊娠结局:A组平均移植胚胎数多于B组,但A组胚胎种植率（67.27%vs 72.65%,P>0.05）及临床妊娠率（69.79%vs 74.77%,P>0.05）均低于B组,两组间无统计学差异,A组流产率低于B组（5.97%vs 8.75%,P>0.05）,两组间无统计学差异。6.HRT准备内膜组FET妊娠结局:在HRT准备内膜组中,A组移植D3天卵裂期胚胎比例及移植胚胎个数均多于B组,且两组间具有统计学差异（P<0.05）。A组胚胎种植率（55.56%vs 68.13%,P>0.05）及临床妊娠率均低于B组（65.22%vs 70.24%,P>0.05）,但无统计学差异。流产率（10.00%vs 6.78%,P>0.05）两组间无统计学差异。7.Gn RH-a+HRT准备内膜组FET妊娠结局:在Gn RH-a+HRT准备内膜组中,A组移植D3天卵裂期胚胎比例及移植胚胎个数两组间相似（P>0.05）。A组胚胎种植率（69.23%vs 73.91%,P>0.05）及临床妊娠率均低于B组（71.88%vs 83.78%,P>0.05）,但无统计学差异。流产率（4.35%vs 12.90%,P>0.05）两组间无统计学差异。8.二元Logistic回归分析:通过前向法构建二元Logistic回归模型,该模型的Hosmer和Lemeshow检验拟合度χ2统计值为1.758（P=0.972）,说明该模型能够很好的拟合数据（P>0.05）,排除移植年龄、平均移植胚胎数及移植胚胎类型混杂因素,结果显示:平均移植胚胎数（OR=0.343,95%CI[0.140-0.840],P<0.05）及移植胚胎类型（OR=2.391,95%CI[1.051-5.439],P<0.05）对是否临床妊娠影响显着,排除混杂因素后分组（OR=1.466,95%CI[0.826-2.604],P>0.05）,仍对是否临床妊娠的影响不显着,也就是添加HCG与否对临床妊娠率的影响不大。结论:HRT-FET周期使用HCG进行黄体支持不能改善临床妊娠率。
娄俊[9]（2020）在《人卵巢子宫内膜异位症中MYH8基因突变及其功能研究》文中进行了进一步梳理背景与目的:子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）是子宫内膜腺体及间质等组织存活于子宫腔外并浸润生长的妇科常见病,主要症状包括盆腔疼痛、性交痛及不育等。EMs虽为良性疾病,却往往表现细胞增殖增强、向周围组织蔓延侵蚀等恶性肿瘤的生物学特性。研究发现,特定基因突变在EMs发生发展中扮演重要作用。肌球蛋白（Myosin）是一组高度保守、在所有真核细胞中均表达的蛋白质,其主要功能是参与转化细胞运动所需的机械能,在细胞迁移和肌肉收缩等过程过发挥作用。肌球蛋白重链8（MYH8）是肌球蛋白家族重要成员,可介导细胞的迁移和粘附等生物学过程。研究发现,包括肠癌、肺癌、卵巢癌和子宫内膜癌在内的多种肿瘤中均存在MYH8基因体细胞突变;功能研究表明MYH8表达异常可导致恶性肿瘤发生。因EMs具有异常增殖、凋亡、侵袭迁移等类肿瘤特征,我们假设EMs患者可能存在MYH8基因突变且在EMs发展中扮演重要作用,影响下游相关信号通路,共同促进EMs发病。方法:收集江西省妇幼保健院病理确诊的152名卵巢EMs患者静脉外周血和卵巢囊壁组织,以及485例非EMs卵巢良性疾病对照女性血和卵巢病变组织样品。经提取血和组织总DNA,PCR扩增、PCR产物纯化、直接测序和序列比对后,分析卵巢子宫内膜异位症患者MYH8基因突变及频率。由Origene公司购入pCMV6-MYH8-DDK过表达质粒,定点诱变分别获取MYH8不同突变型过表达质粒,将上述质粒转染于293T细胞,分别包装得出pCMV6-MYH8-DDK野生型和突变型慢病毒。上述病毒分别感染Ishikawa细胞后,检测Ishikawa细胞后的细胞生物学效应改变:Transwell小室实验去检测细胞侵袭和迁移,流式细胞仪检测细胞的凋亡水平和细胞周期,CCK-8法检测细胞增殖活力,细胞划痕实验验证细胞迁移能力,平板克隆实验检查细胞成瘤能力,以验证MYH8基因突变能否真正促进卵巢子宫内膜异位症发病。随后应用iTRAQ蛋白质组学技术检测pcDNA3.1空载对照、MYH8野生型、2个MYH8突变型的蛋白组学的改变,分析MYH8突变可能影响的下游基因及信号通路。结果:1、152例卵巢子宫内膜异位病变标本中存在2例MYH8 C.1441A>C（p.I481L）和C.4057G>A（p.E1353K）体细胞突变（1.3%）,蛋白质结构模拟结果提示该突变可能会引起MYH8蛋白结构改变。随后,将EMs患者MYH8突变组与无EMs患者临床数据进行相关性分析,未发现与突变有关显着性临床指标。485例非EMs对照女性中未检测到这些MYH8基因突变。2、Transwell小室实验结果表明,相对于MYH8野生型,MYH8突变型（p.I481L、p.E1353K）能够增强Ishikawa细胞的侵袭和迁移能力（P<0.05）,而细胞增殖、细胞平板成瘤、凋亡及周期方面对比研究无统计学差异（P>0.05）。3、iTRAQ技术检测结果表明:与MYH8野生型相比,2个MYH8突变型过表达的Ishikawa细胞共同上调的差异表达蛋白质有256个,下调差异表达蛋白质47个。生物信息分析后发现:MYH8野生型与突变型过表达Ishikawa细胞之间存在6个细胞运动相关蛋白表达差异,提示MYH8突变可能通过这些基因表达异常而促进EMs发病。结论:1、本研究中首次在卵巢子宫内膜异位症中发现MYH8 p.I481L（c.1441A>C）和p.E1353K（C.4057G>A）新突变（1.3%）,且该突变能够导致蛋白质结构改变。2、这两个MYH8新突变能够增强Ishikawa细胞侵袭、迁移（P<0.05）,但是对细胞增殖、细胞平板成瘤、凋亡及周期等无明显影响,提示MYH8新突变可能通过影响细胞的转移能力而促进卵巢子宫内膜异位症的发生。3、iTRAQ蛋白质组学检测结果表明MYH8野生型与突变型过表达Ishikawa细胞之间存在6个细胞运动相关蛋白表达存在差异,提示MYH8突变可能通过这些基因/信号通路促进EMs发病。4、MYH8突变与患者临床数据之间未发现显着相关性。
李如梅[10]（2020）在《胎盘特异性抗原8（PLAC8）对早期胚胎发育与胚胎植入过程的影响研究》文中进行了进一步梳理研究目的（1）PLAC8在不同物种的胚胎发育中具有重要的作用,并且前期研究发现在人类早期胚胎发育的各个时期中均有PLAC8蛋白的表达,然而在人类胚胎发育过程中具体作用仍然未知,因此我们通过构建慢病毒PLAC8敲降载体转染临床上废弃的人类早期胚胎,探讨PLAC8对人胚胎发育的影响。进一步,在细胞水平上探讨PLAC8对人胚胎干细胞的作用机制。（2）前期研究发现PLAC8在人类囊胚体外植入过程中也有表达,并与胚胎的植入状态相关,在植入状态良好的情况下PLAC8表达量高,反之,PLAC8表达量低。本研究则探讨PLAC8对胚胎植入过程的具体影响。研究方法研究一我们通过创建可以转录出敲降PLAC8 m RNA表达的sh RNA慢病毒载体来下调PLAC8表达水平。通过转染小鼠胚胎来确定最适转染滴度。再利用确定好的最适慢病毒滴度转染临床上废弃的早期3PN胚胎,观察对其胚胎卵裂率的影响。进一步,在细胞水平上探讨PLAC8对人胚胎干细胞（h ESCs）的作用机制;通过慢病毒载体感染h ESCs细胞,实时荧光定量PCR（q PCR）和Western Blot（WB）检测PLAC8空载体组、敲降组转染人胚胎干细胞的效率;采用q PCR检测转染慢病毒后人胚胎干细胞增殖相关基因的相对表达情况;利用Western Blot分析细胞增殖marker蛋白的表达情况;进一步利用流式细胞仪检测敲降PLAC8对人胚胎干细胞（h ESCs）凋亡的影响。研究二本实验首先构建PLAC8 RNAi的慢病毒载体;通过体外受精实验获得鼠胎,收集发育至囊胚期的的鼠胚;设置慢病毒滴度分别为1×104TU/ml,1×105TU/ml,1×106TU/ml,1×107TU/ml,1×108TU/ml转染囊胚,明确最佳感染囊胚的慢病毒滴度;最后运用小鼠胚胎子宫移植技术,把经过慢病毒转染过的囊胚移植到假孕母鼠体内,2.5天后处死观察胚胎在子宫中的植入情况。研究结果研究一成功构建了PLAC8的慢病毒敲降体系;慢病毒可以成功转染鼠胚和人类早期胚胎,使用1×107TU/ml诱导PLAC8 RNAi的慢病毒载体感染3PN的第2-3天胚胎,敲降组胚胎卵裂率（6.5）较阴性对照组（空载体组）显着降低（10.57±1.87）;敲降组胚胎停止发育率（86%）显着高于阴性对照组（53%）。慢病毒干扰载体成功转染人胚胎干细胞h ESCs,以GAPDH为内参,阴性对照组与敲降组的PLAC8 m RNA的相对表达量分别是1.00±0.06,0.41±0.06,敲降组PLAC8m RNA表达量低于阴性对照组（P<0.05）,具有统计学意义;Western blot实验结果显示:内参基因是β-actin,敲降组表达下调,进一步证明慢病毒介导干扰质粒能敲降PLAC8蛋白表达。敲降组与阴性对照组相比细胞增殖相关的基因CCND1和Ki67均下调,内参基因是GAPDH,敲降组的CCND1m RNA和ki67m RNA的相对表达量分别是0.46±0.088和0.41±0.174,具有统计学意义;同时敲降组较阴性对照组cyclin D1、PCNA蛋白下调,β-actin为内参蛋白,阴性对照组和敲降组的cyclin D1蛋白表达量分别1.32±0.18和0.78±0.11,PCNA蛋白表达量分别是1.69±0.11和1.41±0.08,经分析差异具有统计学意义。流式细胞术检测敲降组凋亡率比阴性对照组增高。研究二成功收集经过体外受精后的囊胚;经过实验发现运用慢病毒的滴度在1×107TU/ml转染囊胚最合适;成功的把转染后的囊胚移植到小鼠的子宫内,2.5天后发现PLAC8敲降组囊胚附植率低于阴性对照组。研究结论1.首次通过构建PLAC8 RNAi的慢病毒载体感染人类早期发育的胚胎。2.证实了PLAC8影响早期胚胎的发育,敲降早期胚胎的PLAC8基因的表达降低了胚胎的卵裂率。3.细胞实验进一步验证敲降人胚胎干细胞PLAC8基因的表达,会降低细胞增殖表达并促进细胞凋亡。4.敲降囊胚的PLAC8基因表达会导致胚胎的附植率降低。
二、细胞粘附分子与不孕症（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、细胞粘附分子与不孕症（论文提纲范文）
（1）隔药饼灸治疗内异症miRNAs及PI3K-Akt信号通路的理论和实验研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| abstract |
| 注释表 |
| 引言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1 中医对内异症的认识 |
| 1.1 古代文献对内异症的认识 |
| 1.1.1 胞宫生理 |
| 1.1.2 月经生理 |
| 1.1.3 子宫内膜异位症的文献记载 |
| 1.2 子宫内膜异位症的病因病机 |
| 1.3 现代中医名家对内异症的认识 |
| 1.3.1 朱南孙 |
| 1.3.2 夏桂成 |
| 1.3.3 柴嵩岩 |
| 1.3.4 梁瑞宁 |
| 1.3.5 韩延华 |
| 1.3.6 金季玲 |
| 1.4 针灸作用机理的分子细胞生物学研究 |
| 1.4.1 针灸调控miRNA |
| 1.4.2 针灸调控PI3K/Akt信号通路 |
| 2 现代医学对子宫内膜异位症的认识 |
| 2.1 子宫内膜异位症的发病机制 |
| 2.1.1 在位内膜决定论 |
| 2.1.2 免疫调节学说 |
| 2.1.3 菌群失调 |
| 2.2 子宫内膜异位症的流行病学特征 |
| 2.2.1 基因 |
| 2.2.2 遗传/家族史 |
| 2.2.3 体重 |
| 2.2.4 精神心理 |
| 2.2.5 职业性质 |
| 2.2.6 其它 |
| 2.3 miRNA与子宫内膜异位症 |
| 2.3.1 miRNA与细胞粘附、侵袭 |
| 2.3.2 miRNA与细胞生长、增殖 |
| 2.3.3 miRNA与血管形成 |
| 2.4 PI3K/Akt/mTOR信号通路与EMs |
| 第二部分 实验研究 |
| 2.1 实验材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.2 观察指标 |
| 2.2.1 形态学观察 |
| 2.2.2 分子生物学观察 |
| 2.3 实验步骤 |
| 2.3.1 small RNA测序技术,筛选差异表达miRNAs |
| 2.3.2 靶基因功能分析 |
| 2.3.3 PCR验证EMs差异表达的miRNA和 mRNA |
| 2.3.4 WB技术检测PI3K-Akt-mTOR信号通路 |
| 2.4 统计分析 |
| 2.5 实验结果 |
| 2.5.1 镇痛作用 |
| 2.5.2 生长抑制率 |
| 2.5.3 差异化表达的miRNA |
| 2.5.4 PCR验证各组共同调控的miRNA |
| 2.5.5 靶基因功能分析 |
| 2.5.6 PCR验证靶基因 |
| 2.5.7 WB检测PI3K-Akt-mTOR信号通路 |
| 第三部分 讨论 |
| 3.1 灸法在治疗内异症中的作用 |
| 3.1.1 艾灸调整冲任经气 |
| 3.1.2 中药调整冲任经气 |
| 3.2 腧穴在治疗内异症中的作用 |
| 3.2.1 关元的功效 |
| 3.2.2 关元与冲任的关系 |
| 3.2.3 关元穴作用的原理 |
| 3.3 隔药饼灸与miRNA、信号通路、内异症关系探讨 |
| 3.3.1 miRNA表达 |
| 3.3.2 信号通路 |
| 3.3.3 隔药饼灸的作用机理 |
| 第四部分 不足与展望 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 文献综述 子宫内膜异位症发病机制与治疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
（2）人类疱疹病毒6型与女性不孕症的相关性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 第1章 前言 |
| 1.1 研究背景 |
| 第2章 综述 |
| 2.1 不孕症 |
| 2.2 与不孕症相关的病毒感染 |
| 2.2.1 HPV与不孕不育 |
| 2.2.2 HIV与不孕不育 |
| 2.2.3 HSV与不孕不育 |
| 2.2.4 HBV/HCV与不孕不育 |
| 2.2.5 CMV与不孕不育 |
| 2.2.6 ZIKV与不孕不育 |
| 2.2.7 HHV-6 与不孕不育 |
| 第3章 材料与方法 |
| 3.1 一般资料 |
| 3.1.1 研究对象 |
| 3.1.2 纳入及排除标准 |
| 3.2 研究方法 |
| 3.3 主要试剂 |
| 3.4 主要耗材及仪器 |
| 3.5 引物设计与合成 |
| 3.6 实验方法 |
| 3.7 统计学分析 |
| 第4章 结果 |
| 4.1 患者的一般临床特征 |
| 4.2 两组患者子宫内膜中HHV-6 U94 的表达情况 |
| 4.3 两组患者子宫内膜中HHV-6 U42 的表达情况 |
| 4.4 两组患者子宫内膜中HHV-6 的感染状态 |
| 第5章 讨论 |
| 5.1 介绍HHV-6 |
| 5.2 HHV-6 与不孕症 |
| 5.3 HHV-6 可能导致不孕症的可能方式及途径 |
| 5.4 实验结果分析 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（3）YAP/TAZ在小鼠子宫蜕膜化过程中的作用及调节机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩写词表 |
| 前言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第1章 哺乳动物胚胎着床和蜕膜化的研究进展 |
| 1.1 哺乳动物胚胎着床 |
| 1.2 子宫内膜蜕膜化 |
| 1.3 胚胎着床和蜕膜化的调控机制 |
| 1.3.1 类固醇激素及其受体 |
| 1.3.2 细胞因子 |
| 1.3.3 转录因子 |
| 1.3.4 骨形态发生蛋白 |
| 1.3.5 Notch信号通路 |
| 1.3.6 其他因子 |
| 1.3.7 氧化应激 |
| 1.4 小结 |
| 第2章 Hippo信号通路的研究进展 |
| 2.1 Hippo信号通路简介 |
| 2.2 YAP/TAZ的生物学功能 |
| 2.2.1 YAP/TAZ在发育过程中的作用 |
| 2.2.2 YAP/TAZ在再生过程中的作用 |
| 2.2.3 YAP/TAZ与癌症发生 |
| 2.3 Hippo-YAP/TAZ的调节机制 |
| 2.3.1 细胞间接触与细胞形状 |
| 2.3.2 细胞极性与细胞粘附 |
| 2.3.3 Wnt/β-Catenin信号通路 |
| 2.3.4 代谢 |
| 2.3.5 G蛋白偶联受体 |
| 2.4 YAP/TAZ与哺乳动物生殖 |
| 2.5 小结 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第1章 YAP在小鼠子宫蜕膜化过程中的作用及调节机制 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 实验试剂 |
| 1.1.3 动物模型的建立 |
| 1.1.4 原位杂交 |
| 1.1.5 小鼠子宫蜕膜细胞与基质细胞的分离培养 |
| 1.1.6 免疫荧光染色 |
| 1.1.7 免疫蛋白印迹(Western blot) |
| 1.1.8 荧光定量PCR |
| 1.1.9 基因过表达与沉默 |
| 1.1.10 双荧光素酶报告基因检测 |
| 1.1.11 细胞转染 |
| 1.1.12 细胞增殖 |
| 1.1.13 细胞周期 |
| 1.1.14 细胞凋亡 |
| 1.1.15 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性 |
| 1.1.16 ROS含量检测 |
| 1.1.17 丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量检测 |
| 1.1.18 8-OHd G含量检测 |
| 1.1.19 抗氧化系统及Caspase-3 活性检测 |
| 1.1.20 线粒体膜电位和通透性转换孔的检测 |
| 1.1.21 ATP含量检测 |
| 1.1.22 数据统计分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 YAP m RNA在小鼠早期妊娠子宫中的表达 |
| 1.2.2 YAP在体内和体外人工诱导蜕膜化模型中的表达 |
| 1.2.3 YAP在蜕膜化过程中的作用 |
| 1.2.4 Bmp2 诱导基质细胞中YAP核迁移并增强YAP功能 |
| 1.2.5 YAP通过Rrm2 调控基质细胞的分化 |
| 1.2.6 Bmp2 通过YAP调控Rrm2 的表达 |
| 1.2.7 YAP失活导致基质细胞GSH产生下降并诱导ROS含量升高 |
| 1.2.8 YAP失活导致基质细胞线粒体功能紊乱并抑制蜕膜化 |
| 1.2.9 YAP失活诱导基质细胞凋亡 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 第2章 TAZ在小鼠子宫蜕膜化过程中的作用及调节机制 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 TAZ在小鼠早期妊娠子宫中的表达 |
| 2.2.2 TAZ在体内和体外人工诱导蜕膜化模型中的表达 |
| 2.2.3 TAZ在蜕膜化过程中的作用 |
| 2.2.4 TAZ介导HB-EGF对蜕膜化的调节 |
| 2.2.5 TAZ保护基质细胞分化免受氧化损伤 |
| 2.2.6 TAZ通过增强基质细胞的抗氧化能力来抵抗氧化应激对基质细胞分化的损伤 |
| 2.2.7 氧化应激状态下TAZ可保护基质细胞线粒体功能 |
| 2.2.8 TAZ可抑制H_2O_2诱导的基质细胞凋亡 |
| 2.2.9 氧化应激状态下TAZ通过Nrf2/ARE/Foxo1 途径增强基质细胞抗氧化能力 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附表1 基因引物序列 |
| 附表2 siRNA序列 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 攻读博士学位期间取得的科研成果 |
| 致谢 |
（4）多囊卵巢综合征对于围着床期子宫中免疫细胞及细胞外基质的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 多囊卵巢综合征流行病学 |
| 1.2 多囊卵巢综合征的诊断和病理生理 |
| 1.2.1 PCOS的诊断标准 |
| 1.2.2 PCOS的病理生理 |
| 1.3 多囊卵巢综合征与不孕症 |
| 1.4 妊娠早期子宫中免疫细胞的研究现状 |
| 1.4.1 妊娠早期免疫耐受 |
| 1.4.2 各类免疫细胞在妊娠早期子宫中的变化 |
| 1.4.2.1 巨噬细胞 |
| 1.4.2.2 树突状细胞 |
| 1.4.2.3 中性粒细胞 |
| 1.4.2.4 肥大细胞 |
| 1.4.2.5 B细胞 |
| 1.5 围着床期细胞间连接和细胞外基质的变化 |
| 1.5.1 细胞黏着分子-钙粘蛋白 |
| 1.5.2 膜细胞骨架连接蛋白-埃兹蛋白 |
| 1.5.3 细胞外基质-层粘连蛋白 |
| 1.5.4 细胞外基质-胶原蛋白IV |
| 1.5.5 细胞质膜表面的粘多糖—糖萼 |
| 1.6 多囊卵巢综合征动物模型的构建 |
| 1.7 本论文的研究目的、意义及技术路线 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 动物模型的构建 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 药物配制 |
| 2.1.3 动物材料收集 |
| 2.1.4 PCOS小鼠模型 |
| 2.1.5 早期妊娠 |
| 2.1.6 围着床期DHEA短期处理早期妊娠小鼠 |
| 2.1.7 围着床期DHEA处理假孕小鼠 |
| 2.1.8 DHEA处理卵巢切除小鼠 |
| 2.2 PCOS小鼠模型子宫中m RNA表达谱的研究 |
| 2.2.1 研究对象 |
| 2.2.2 样品总RNA提取 |
| 2.2.3 样品RNA检测 |
| 2.2.4 RNA文库的构建与质量检测 |
| 2.2.5 上机测序 |
| 2.2.6 数据分析 |
| 2.3 人子宫内膜收集 |
| 2.4 免疫组织化学 |
| 2.4.1 试剂配制 |
| 2.4.2 免疫组化中使用的抗体 |
| 2.4.3 石蜡包埋及切片 |
| 2.4.4 具体操作步骤 |
| 2.5 免疫荧光 |
| 2.5.1 试剂配制 |
| 2.5.2 免疫荧光中使用的抗体 |
| 2.5.3 具体操作步骤 |
| 2.6 卵巢组织苏木精-伊红染色 |
| 2.6.1 石蜡切片脱蜡复水 |
| 2.6.2 染色步骤 |
| 2.7 甲苯胺蓝染色 |
| 2.7.1 染色试剂配制 |
| 2.7.2 甲苯胺蓝染色步骤 |
| 2.8 Western Blot |
| 2.8.1 所用试剂配制 |
| 2.8.2 制备蛋白样品 |
| 2.8.3 测定蛋白浓度并制备上样液 |
| 2.8.4 SDS-PAGE凝胶电泳 |
| 2.8.5 蛋白条带转膜 |
| 2.8.6 免疫印迹 |
| 2.9 Real-time PCR |
| 2.9.1 样品总RNA提取 |
| 2.9.2 反转录 |
| 2.9.3 qPCR引物设计 |
| 2.9.4 qPCR具体步骤 |
| 2.9.5 数据分析 |
| 2.10 统计学分析 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 PCOS模型的成功建立 |
| 3.1.1 表观及着床结局指标 |
| 3.1.2 病理学指标 |
| 3.1.3 血清生化指标 |
| 3.1.4 子宫中雄激素受体测定 |
| 3.2 PCOS模型小鼠子宫的m RNA表达谱测序结果 |
| 3.2.1 RNA质量评估 |
| 3.2.2 原始测序数据过滤及质量评估 |
| 3.2.3 参考基因组比对 |
| 3.2.4 基因表达分布和样本间相关性 |
| 3.2.5 差异基因的筛选 |
| 3.2.6 富集分析 |
| 3.3 DHEA对子宫免疫细胞数量及定位的影响 |
| 3.3.1 中性粒细胞 |
| 3.3.2 巨噬细胞 |
| 3.3.3 树突状细胞(DC) |
| 3.3.4 肥大细胞 |
| 3.3.5 B细胞 |
| 3.4 DHEA对子宫细胞间连接和细胞外基质的影响 |
| 3.4.1 埃兹蛋白 |
| 3.4.2 钙黏蛋白 |
| 3.4.3 细胞外基质-层粘连蛋白 |
| 3.4.4 胶原蛋白IV |
| 3.4.5 CD31 |
| 3.4.6 UEA受体 |
| 第四章 全文讨论 |
| 4.1 PCOS小鼠模型的成功构建 |
| 4.2 PCOS小鼠妊娠第4 天子宫m RNA表达谱的启示 |
| 4.3 PCOS围着床期子宫中免疫细胞异常变化 |
| 4.4 PCOS 围着床期子宫上皮细胞间连接的改变 |
| 4.5 PCOS围着床期子宫细胞外基质的变化 |
| 4.6 PCOS围着床期子宫上皮细胞质膜表面糖萼的变化 |
| 第五章 结论 |
| 5.1 主要结论 |
| 5.2 创新点 |
| 5.3 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
| 附件 |
（5）子宫内膜异位症及其腹腔镜手术治疗与不良妊娠结局情况的相关性分析（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 1. 资料与方法 |
| 1.1 临床资料 |
| 1.2 手术方法 |
| 1.3 研究方法 |
| 1.4 统计学方法 |
| 1.5 临床资料处理流程图 |
| 2. 结果 |
| 2.1. 研究对象一般资料 |
| 2.2. 术后妊娠结局回访 |
| 2.3. 术后妊娠结局比较分析 |
| 3. 讨论 |
| 3.1 内异症与受孕方式的相关性 |
| 3.2 内异症与分娩方式的相关性 |
| 3.3 内异症与胎儿宫内窘迫的相关性 |
| 3.4 内异症与妊娠早期黄体酮治疗的相关性 |
| 3.5 内异症与胎位异常的相关性 |
| 3.6 内异症与前置胎盘的相关性 |
| 3.7 内异症R-AFS分期与不良妊娠结局的相关性 |
| 3.8 内异症的病理分型与不良妊娠结局的相关性 |
| 3.9 内异症手术治疗 |
| 3.10 内异症手术治疗与术后妊娠的间隔时间与不良妊娠结局的相关性 |
| 4. 总结 |
| 参考文献 |
| 综述 子宫内膜异位症相关盆腔粘连的发生机制及可能的治疗方法 |
| 参考文献 |
| 中英文对照缩略词表 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
（6）基于血清外泌体蛋白组联合复杂网络分析的针刺潜在治疗病谱及针刺网络调节作用规律的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 研究内容一 基于血清外泌体蛋白组联合复杂网络分析的针刺潜在治疗病谱研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 |
| 研究内容二 基于血清外泌体蛋白组联合复杂网络分析的针刺网络调节作用规律研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 综述 计算生物学的研究进展 |
| 1 深度学习在生物医学中的应用 |
| 2 计算学在脑神经科学中的应用 |
| 3 计算学在组学研究中的应用 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）多模态超声评估子宫内膜容受性在黄体功能不全所致复发性自然流产中的应用研究（论文提纲范文）
| 中文提要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 多模态超声评估黄体功能不全所致复发性自然流产患者与正常人群子宫内膜容受性 |
| 1.资料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 4.小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 多模态超声评估药物治疗对黄体功能不全所致复发性自然流产患者子宫内膜容受性的影响 |
| 1.资料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 4.小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 药物治疗对黄体功能不全所致复发性自然流产患者妊娠结局的影响 |
| 1.资料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 4.小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 多模态超声评估子宫内膜容受性在黄体功能不全所致复发性自然流产患者药物治疗中的指导价值 |
| 1.资料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 4.小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 子宫内膜容受性的研究现状 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间公开发表论文 |
| 中英文对照缩略词表 |
| 致谢 |
（8）HCG用于人工周期冻融胚胎移植后黄体支持的前瞻性随机对照研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一部分 黄体支持 |
| 1 新鲜周期黄体特点 |
| 1.1 正常黄体功能 |
| 1.2 超促排卵取卵后黄体功能 |
| 2 FET周期黄体特点 |
| 2.1 自然周期FET(NC-FET) |
| 2.2 人工周期冻融胚胎移植(HRT-FET) |
| 3 常用黄体支持药物 |
| 3.1 黄体酮 |
| 3.2 促性腺激素释放激素激动剂 |
| 3.3 雌激素 |
| 3.4 人绒毛膜促性腺激素 |
| 4 黄体支持存在问题 |
| 4.1 新鲜周期黄体支持存在问题 |
| 4.2 冻融周期黄体支持存在问题 |
| 4.3 个体化黄体支持 |
| 第二部分 HCG在胚胎种植过程中的作用 |
| 1 HCG结构及其生物学功能 |
| 1.1 R-HCG的生物学功能 |
| 1.2 H-HCG的生物学功能 |
| 1.3 H-HCG游离β链的生物学功能 |
| 2 HCG对胚胎植入的影响 |
| 2.1 正常胚胎植入 |
| 2.2 HCG对胚胎植入的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.3 统计学处理 |
| 2 流程图 |
| 3 结果 |
| 3.1 两组基线情况比较 |
| 3.2 COH方案及实验室情况 |
| 3.3 FET周期临床结局 |
| 3.4 D3 卵裂期胚胎FET周期妊娠结局 |
| 3.5 D5 囊胚期胚胎FET周期妊娠结局 |
| 3.6 HRT准备内膜FET周期妊娠结局 |
| 3.7 GnRH-a+HRT准备内膜FET周期妊娠结局 |
| 3.8 二元Logistic回归分析 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（9）人卵巢子宫内膜异位症中MYH8基因突变及其功能研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 前言 |
| 1.1 概述 |
| 1.2 流行病学 |
| 1.3 诊断方式 |
| 1.3.1 血清标志物 |
| 1.3.2 超声检查 |
| 1.3.3 计算机断层扫描 |
| 1.3.4 腹腔镜检查 |
| 1.4 遗传因素 |
| 1.4.1 基因种系突变 |
| 第2章 实验和方法 |
| 2.1 实验试剂 |
| 2.2 主要仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 研究对象 |
| 2.3.2 血和组织DNA提取 |
| 2.3.3 DNA浓度与纯度的检测、标化 |
| 2.3.4 PCR扩增实验 |
| 2.3.5 pCMV6-hMYH8-DDK突变型质粒的构建 |
| 2.3.6 构建慢病毒载体:MYH8 突变型(MT)2 个、野生型(WT)及空载质粒(vector) |
| 2.3.7 MYH8 野生型、突变型及对照慢病毒质粒感染Ishikawa细胞 |
| 2.3.8 免疫印迹法检测MYH8 野生型、突变型、空载慢病毒在Ishikawa细胞中的表达 |
| 2.3.9 细胞学功能检测空载质粒、MYH8 野生型及MYH8 突变型 |
| 2.3.10 iTRAQ蛋白组学分析技术筛选MYH8 突变型2 个、野生型1 个以及空载体差异表达蛋白 |
| 2.4 统计分析 |
| 第3章 实验结果 |
| 3.1 MYH8 突变与生物学特性及临床特征的关系 |
| 3.2 MYH8 分析结果 |
| 3.3 样本DNA提取后PCR扩增图谱 |
| 3.4 MYH8 蛋白表达 |
| 3.5 细胞侵袭及迁移实验各组细胞迁移和侵袭能力的比较 |
| 3.6 平板克隆实验比较上述不同细胞的成瘤能力 |
| 3.7 细胞划痕实验结果 |
| 3.8 CCK-8 法检测细胞增殖率 |
| 3.9 野生型及突变型ISHIKAWA细胞凋亡的变化 |
| 3.10 基于ITRAQ的 MYH8 突变型和野生型过表达ISHIKAWA细胞的差异表达蛋白组学分析结果 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（10）胎盘特异性抗原8（PLAC8）对早期胚胎发育与胚胎植入过程的影响研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词对照表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 PLAC8对人植入前早期胚胎发育的影响 |
| 1.前言 |
| 2.实验材料 |
| 3.实验方法 |
| 4.统计学方法 |
| 5.实验结果 |
| 6.讨论 |
| 7.结论 |
| 第二部分 PLAC8在胚胎植入过程的作用 |
| 1.前言 |
| 2.实验材料 |
| 3.实验方法 |
| 4.统计学方法 |
| 5.实验结果 |
| 6.讨论 |
| 7.结论 |
| 参考文献 |
| 附录 :个人简历 |
| 致谢 |
| 综述 胚胎植入子宫过程的机制调节研究进展 |
| 参考文献 |
四、细胞粘附分子与不孕症（论文参考文献）
- [1]隔药饼灸治疗内异症miRNAs及PI3K-Akt信号通路的理论和实验研究[D]. 徐鹏. 江西中医药大学, 2021(01)
- [2]人类疱疹病毒6型与女性不孕症的相关性研究[D]. 顾路路. 吉林大学, 2021(01)
- [3]YAP/TAZ在小鼠子宫蜕膜化过程中的作用及调节机制[D]. 于海帆. 吉林大学, 2021
- [4]多囊卵巢综合征对于围着床期子宫中免疫细胞及细胞外基质的影响[D]. 吴洋. 兰州大学, 2021(09)
- [5]子宫内膜异位症及其腹腔镜手术治疗与不良妊娠结局情况的相关性分析[D]. 周小叶. 苏州大学, 2020(02)
- [6]基于血清外泌体蛋白组联合复杂网络分析的针刺潜在治疗病谱及针刺网络调节作用规律的研究[D]. 陈勇. 天津中医药大学, 2020
- [7]多模态超声评估子宫内膜容受性在黄体功能不全所致复发性自然流产中的应用研究[D]. 焦岩. 苏州大学, 2020(06)
- [8]HCG用于人工周期冻融胚胎移植后黄体支持的前瞻性随机对照研究[D]. 黄愈. 西安医学院, 2020(08)
- [9]人卵巢子宫内膜异位症中MYH8基因突变及其功能研究[D]. 娄俊. 南昌大学, 2020(08)
- [10]胎盘特异性抗原8（PLAC8）对早期胚胎发育与胚胎植入过程的影响研究[D]. 李如梅. 安徽医科大学, 2020(02)