一、骨桥蛋白与细胞免疫（论文文献综述）
杨宝瑜[1]（2021）在《基于网络分析的肾结石关键基因和信号通路的鉴定及其分子机制研究》文中进行了进一步梳理本文使用生物信息学组学整合方法以及细胞分子生物学方法对肾结石形成与发展的分子机制进行研究。首先,使用蛋白质相互作用网络分析方法,分析肾结石相关蛋白质组学研究数据,预测发现肾结石相关核心蛋白富集于与内质网应激及内质网应激相关的降解等生物学事件上。细胞分子生物学实验证明,草酸钙刺激肾小管上皮细胞以及大鼠肾结石模型,大鼠肾脏组织通过三条通路（包括PERK,IRE1和ATF6）发生了内质网应激,并且使用内质网应激诱导剂和抑制剂证明了内质网应激影响细胞凋亡以及结晶——细胞黏着。然后,肾结石相关基因组及转录组数据整合分析中进一步发现,细胞窖蛋白1（Caveolin-1,CAV1）和表皮细胞生长因子（Epidermal Growth Factor,EGFR）是两个肾结石相关核心蛋白,而细胞黏着斑信号通路（Focal adhesion）为关键的细胞信号转导通路。实验证明草酸钙刺激肾小管上皮细胞及肾结石动物模型中,细胞及大鼠动物组织CAV1,EGFR,AKT蛋白表达下调,m RNA水平不变。过表达CAV1后草酸钙刺激导致的细胞凋亡和细胞表面钙离子黏着水平增加的情况被逆转。添加蛋白酶体抑制剂后草酸钙下调CAV1及EGFR蛋白的情况被逆转,暗示这两个核心蛋白在草酸钙刺激下可能通过内质网应激相关的泛素——蛋白酶体途径降解。综上,本论文首次发现,肾脏草酸钙结晶诱导内质网应激并通过翻译后调控影响CAV1-EGFR-AKT黏着斑信号通路,进而导致细胞凋亡和结晶——细胞相互作用增强。该研究为肾脏中结晶——细胞相互作用的分子机制提供了崭新的解释,为肾结石防治新靶点的研发提供了参考。
王明明[2]（2021）在《动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者血浆骨桥蛋白水平与临床预后的相关性分析》文中研究表明目的测定动脉瘤性蛛网膜下腔出血（Aneurysmal subarachnoid hemorrhage a SAH）患者血浆骨桥蛋白（Osteopontin OPN）水平,并探讨其临床意义与患者预后的相关性。方法本研究共纳入2019年7月～2020年9月就诊于甘肃省人民医院神经外科的动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者45例,纳入对照组为我院体检中心体检对象20例,其年龄、性别等基础资料相匹配。运用Hunt-Hess分级、WFNS分级、m Fisher分级评估入院患者病情严重程度,并收集患者发病后第一天、第二天、第三天、第五天、第七天的静脉血,运用ELISA实验方法检测患者血浆OPN水平,比较两组之间的差异性,以及探讨影响OPN水平的因素,并探讨血浆OPN水平与a SAH患者预后的相关性,根据ROC曲线确定血浆OPN水平的临界值,对a SAH患者发病后90天的不良预后进行预测。结果两组之间年龄、性别、吸烟史、饮酒史、糖尿病病史和高血压病史差异均无统计学意义（P>0.05）,两组之间血浆OPN水平具有显着统计学意义（P<0.01）。患者发病后血浆OPN逐渐升高,第三天达到峰值,随之缓慢下降;且血浆OPN水平与并发症、Hunt-Hess分级、WFNS分级、m Fisher分级之间具有相关性（P<0.01）。预后标准参考GOS评分,影响预后的单因素分析可得:高血压、并发症、Hunt-Hess分级、WFNS分级、m Fisher分级、血浆OPN水平与预后不良之间有统计学差异性（P<0.05）;并用二元Logistic回归分析结果显示:血浆OPN水平（OR=1.173,95%CI:1.003-1.373,P=0.046）、WFNS分级（OR=0.012,95%CI:0.000-0.867,P=0.043）、m Fisher分级（OR=0.036,95%CI:0.002-0.621,P=0.022）、并发症（OR=0.015,95%CI:0.000-0.777,P=0.037）为发生a SAH后患者预后不良的危险因素。通过作ROC曲线可得:发病第三天的血浆OPN水平（≥86.975ng/ml）具有较高的诊断价值,其敏感度为75.0%,特异度为75.9%（AUC=0.797,95%CI:0.669-0.926,P=0.001）,因此可得出当血浆OPN水平≥86.975ng/ml时可能成为90天预后不良的预测因子。结论动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者血浆OPN水平高于对照组;并且患者病情越重,血浆OPN水平越高;血浆OPN水平有可能成为预测aSAH患者预后的潜在生物标志物。
刘坤,齐红双,李英,潘卫东[3]（2021）在《血清OPN、SIL-2R、IL-2水平对活动性肺结核病情及预后判定的意义》文中研究指明目的研究血清骨桥蛋白（OPN）、可溶性白细胞介素-2受体（sIL-2R）、白细胞介素-2（IL-2）水平对活动性肺结核（ATB）病情及预后判定的意义。方法回顾性分析2018年1月至2019年9月河南大学附属南石医院诊治的108例ATB患者、71例非ATB肺结核病患者的临床资料,另选择同期来本院进行体检健康者68例作为对照组,检测三组研究对象的血清OPN、SIL-2R、IL-2水平,并分析上述因子与ATB患者病情严重程度的关系。所有ATB患者均给予抗结核治疗,随访6个月,分析血清OPN、SIL-2R、IL-2水平与预后的关系及其三者之间的相关性。结果三组研究对象血清OPN、SIL-2R、IL-2水平比较差异有统计学意义（P<0.05）,其中ATB患者OPN、SIL-2R水平高于非ATB和对照组,血清IL-2水平低于非ATB组和对照组（P<0.05）;轻症ATB患者血清OPN、SIL-2R水平低于重症组患者,血清IL-2水平高于重症组（P<0.05）;预后良好ATB患者血清OPN、SIL-2R水平低于预后不佳患者,血清IL-2水平高于预后不佳患者（P<0.05）;ATB患者血清OPN水平与SIL-2R水平呈正相关,与IL-2水平呈弱负相关（P<0.05）。结论 ATB患者血清OPN、SIL-2R水平明显升高,IL-2水平明显降低,且三者均与疾病严重程度和预后密切相关。
张杰[4]（2020）在《长链非编码RNA MALAT1通过吸附miR-127-5p调控骨桥蛋白在草酸钠结晶肾损伤中的机制研究》文中研究表明【背景】肾结石是一种临床上常见病多发病,而肾结石所导致的慢性肾脏病以及终末期肾病已成为一个突出的公共卫生问题。作为肾结石的早期表现,目前还没有有效的预防和治疗肾结晶引起的肾损伤的方法。晶体诱导肾损伤病理形成和晶体物质对肾小管上皮细胞的刺激有直接的关联,在晶体物质的刺激下,氧化应激的发生会引发肾小管较为明显的炎症反应,发生肾结石的风险也相应增加。近几年发展过程中,很多研究学者对代谢性疾病展开研究和分析,如果罹患泌尿系结石,那么发生代谢性疾病的可能性也明显增加,代谢性疾病的发生和结石有直接的关联。机体的微炎症状态、氧化应激的激活以及上皮间质转化的发生也会对肾结石发生产生影响,肾脏疾病的发病率进而增加,便会导致梗阻性肾病的发生。肾小管上皮细胞在晶体物质的刺激作用下,会分泌一些物质,其中最主要的物质就是骨桥蛋白,也就是OPN,进一步招募炎症细胞如单核-巨噬细胞迁移到病变部位,从而加重结晶部位的炎症反应。结晶的形成是一种生物矿化的过程,骨桥蛋白参与这一过程并发挥重要作用。但调控骨桥蛋白分泌的确切机制尚不清楚。长链非编码RNA（Long non-coding RNA,lnc RNA）其转录长度超过200nt,是非编码RNA的一个重要构成部分。目前已被大量研究证实在多种人类疾病中发挥重要的调控作用,主要表现在从表观遗传学调控角度阐明疾病的发生发展机制。但是仅有少数lnc RNA的功能和机制得到了充分的阐明。在肾脏病研究领域,目前已有很多关于lnc RNA的研究报道。本课题研究团队前期通过生物芯片筛选了OPN相关的lnc RNA基因表达谱,而lnc RNA的种属间保守性较差,通过小鼠样本研究得到的lnc RNA极为有限。为了进一步探究lnc RNA的生物学功能,我们重点关注了芯片数据中OPN相关lnc RNA MALAT1在草酸钠结晶肾损伤中的调控作用,以期从基因调控角度为临床防治结晶肾损伤提供指导依据。【目的】探讨长链非编码RNA MALAT1在草酸钠诱导的结晶肾损伤中的表达变化,生物学功能及其潜在作用机制,为临床上草酸盐所致结晶性肾损伤的防治提供理论依据和治疗靶点。【方法】1.借助结晶肾损伤模型的构建,把草酸钠作为刺激物质,对肾小管上皮细胞进行刺激,并采用实时荧光定量PCR技术、蛋白免疫印迹分析（western blot）以及荧光原位杂交技术在草酸钠刺激肾小管上皮细胞（HK-2）体外模型中鉴定MALAT1的细胞定位,验证MALAT1及骨桥蛋白OPN的表达水平。2.采用RNA干扰技术构建MALAT1敲低细胞模型。检测肾小管上皮细胞的细胞增殖活性、细胞粘附、凋亡诱导情况以探究MALAT1在草酸钠诱导的结晶肾损伤中的生物学功能。3.应用生物信息学技术、双荧光素酶报告系统探究MALAT1在草酸钠结晶肾损伤中调控骨桥蛋白的潜在机制。【结果】1.成功构建草酸钠刺激肾小管上皮细胞结晶肾损伤细胞模型并且通过实时荧光定量PCR法验证MALAT1在草酸钠结晶肾损伤细胞模型中表达上调。2.骨桥蛋白在草酸钠结晶肾损伤细胞模型中表达上调;肾小管上皮细胞增殖活力减弱,凋亡诱导增加,干扰MALAT1细胞增殖活力进一步减弱,加重凋亡诱导。3.基于生物信息学分析及文献检索发现mi R-127-5p分别与MALAT1以及骨桥蛋白的3’UTR直接结合。4.在线lnc RNA与mi RNA数据库分析及双荧光素酶报告系统验证mi R-127-5p介导MALAT1对骨桥蛋白的调控作用。5.mi R-127-5p抑制剂可部分逆转因干扰MALAT1所介导的骨桥蛋白低表达水平。【结论】通过体外构建人肾小管上皮细胞结晶肾损伤模型证实Lnc RNA MALAT1通过吸附mi R-127-5p调控骨桥蛋白并影响细胞增殖及黏附活性进而参与草酸钠结晶肾损伤的发生过程,能够为探究晶体刺激导致肾损伤疾病的预防和治疗提供可行性经验参考。
司学哲[5]（2020）在《Echistatin/BYL-719干预细胞外基质在大鼠矽肺纤维化发生中的作用》文中指出背景课题组研究表明整合素/整合素连接酶/PI3K信号通路可能介导细胞外基质（extracellular matrix,ECM）的合成与降解,整合素/整合素连接酶/PI3K信号通路可能是矽肺纤维化发生通路之一;有研究表明ECM的合成和降解参与矽肺纤维化的发生和发展,但是Echistatin/BYL-719干预细胞外基质在矽肺纤维化发生中的作用研究较少。因此本研究选择此通路的两个抑制剂（Echistatin/BYL-719）来探索矽肺可能发生、发展机制。目的应用吸入式气管滴注法建造矽肺大鼠模型,采用Echistatin/BYL-719腹腔注射进行干预,探讨大鼠干预前后相关指标的变化,分析细胞外基质成分变化在大鼠矽肺纤维化发生、发展中的作用。方法选取SPF级雄性大鼠48只,分为生理盐水组,矽肺模型组,Echistatin干预剂组（去整合素干预组）、BYL-719干预剂组（PI3K抑制剂干预组）,每组分28d和56d两个时间亚组,共八组,每组6只。实验期间每周固定时间测量大鼠体重,分别在28 d和56d对28d和56d时间亚组大鼠采用水合氯醛麻醉,称重,经腹主动脉采血,处死大鼠。右肺下叶4%多聚甲醛固定,用于病理观察;另取右肺中叶于冰上切大小约2 x 2 x 2 mm肺组织于2.5%的戊二醛固定,用于电镜观察;左肺-80度冰箱保存用于检测指标;采用Western印迹法检测左肺组织中矽肺纤维化指标（I型胶原蛋白、III型胶原蛋白）、细胞外基质指标（层粘连蛋白（LN）、骨桥蛋白（OPN））、细胞外基质调节酶指标（基质金属蛋白酶1（MMP1）、基质金属蛋白酶3（MMP3））等蛋白表达。结果1.一般中毒症状的观察:在造模一周后大鼠没有明显的异常症状,第二周开始模型组和两种干预剂组出现气喘,能听到呼呼的肺呼吸音。模型组和两种干预剂组有疲倦懒散,没有食欲,有掉毛的情况。随着时间进展,模型组大鼠以上症状逐渐加重,两干预组以上症状较模型组稍轻。处死解剖时,个别动物存在肺部囊肿的情况。2.HE染色病理结果:28天:生理盐水组大鼠肺组织肺泡结构正常无增厚现象,但肺泡间质内有轻微炎症;矽肺模型组大鼠肺组织内出现细胞性结节或矽小结,并伴有大量炎性细胞浸润,肺泡壁出现不同程度的增厚现象,以结节处最为突出。56天:大致情况和28天各组一致;炎症细胞浸润更加明显;矽结节数量增多。Echistatin去整合素组和BYL-719 PI3K抑制剂组纤维化程度减轻,矽结节数目减少,但仍有炎症细胞浸润,肺泡间隔增宽等现象。3.饲养过程中,矽肺模型组和两种干预剂组相对于生理盐水组饮食饮水量有一定减少,状态不如生理盐水组活跃,体重下降。两种干预剂组较矽肺模型组在体重减轻上有一定程度改善。4.经方差分析,给药28天后,实验各组大鼠肺组织内Ⅰ型胶原蛋白含量比较差异有统计学意义（F=28.782,P<0.05）,矽肺模型组与生理盐水组比较,大鼠肺组织内Ⅰ型胶原蛋白含量升高（P<0.05）,去整合素干预组和PI3K抑制剂干预组与矽肺模型组比较,大鼠肺组织内Ⅰ型胶原蛋白含量均降低（P<0.05）;实验各组大鼠肺组织内Ⅲ型胶原蛋白含量比较差异有统计学意义（F=4.416,P<0.05）,矽肺模型组与生理盐水组比较,大鼠肺组织内Ⅲ型胶原蛋白含量升高（P<0.05）,去整合素干预组和PI3K抑制剂干预组与矽肺模型组比较,大鼠肺组织内Ⅲ型胶原蛋白含量均降低（P<0.05）。5.经方差分析,给药28天后,实验各组大鼠肺组织内骨桥蛋白含量比较差异有统计学意义（F=1.253,P<0.05）,矽肺模型组与生理盐水组比较,大鼠肺组织内骨桥蛋白含量升高（P<0.05）,去整合素干预组与矽肺模型比较,大鼠肺组织内骨桥蛋白含量差异无统计学意义,PI3K抑制剂干预组与矽肺模型组比较,大鼠肺组织内骨桥蛋白含量升高（P<0.05）;实验各组大鼠肺组织内层粘连蛋白含量比较差异有统计学意义（F=2.072,P<0.05）,矽肺模型组与生理盐水组比较,大鼠肺组织内层粘连蛋白含量升高（P<0.05）,去整合素干预组与矽肺模型比较,大鼠肺组织内层粘连蛋白含量差异无统计学意义（P<0.05）,PI3K抑制剂干预组与矽肺模型组比较,大鼠肺组织内层粘连蛋白含量降低（P<0.05）。6.经方差分析,给药28天后,实验各组大鼠肺组织内MMP1含量比较差异有统计学意义（F=5.754,P<0.05）,矽肺模型组与生理盐水组比较,大鼠肺组织内MMP1含量升高（P<0.05）,去整合素干预组和PI3K抑制剂干预组与矽肺模型组比较,大鼠肺组织内MMP1含量均升高（P<0.05）;实验各组大鼠肺组织内MMP3含量比较差异有统计学意义（F=6.371,P<0.05）,矽肺模型组与生理盐水组比较,大鼠肺组织内MMP3含量升高（P<0.05）,去整合素干预组和PI3K抑制剂干预组与矽肺模型组比较,大鼠肺组织内MMP3含量均升高（P<0.05）。7.经方差分析,给药56天后,实验各组大鼠肺组织内Ⅰ型胶原蛋白含量比较差异有统计学意义（F=40.273,P<0.05）,矽肺模型组与生理盐水组比较,大鼠肺组织内Ⅰ型胶原蛋白含量升高（P<0.05）,去整合素干预组和PI3K抑制剂干预组与矽肺模型组比较,大鼠肺组织内Ⅰ型胶原蛋白含量均降低（P<0.05）;实验各组大鼠肺组织内Ⅲ型胶原蛋白含量比较差异有统计学意义（F=7.438,P<0.05）,矽肺模型组与生理盐水组比较,大鼠肺组织内Ⅲ型胶原蛋白含量升高（P<0.05）,去整合素干预组和PI3K抑制剂干预组与矽肺模型组比较,大鼠肺组织内Ⅲ型胶原蛋白含量均降低（P<0.05）。8.经方差分析,给药56天后,实验各组大鼠肺组织内骨桥蛋白含量比较差异有统计学意义（F=2.135,P<0.05）,矽肺模型组与生理盐水组比较,大鼠肺组织内骨桥蛋白含量均升高（P<0.05）,去整合素干预组和PI3K抑制剂干预组与矽肺模型组比较,大鼠肺组织内骨桥蛋白含量升高（P<0.05）;实验各组大鼠肺组织内层粘连蛋白含量比较差异有统计学意义（F=4.077,P<0.05）,矽肺模型组与生理盐水组比较,大鼠肺组织内层粘连蛋白含量升高（P<0.05）,去整合素干预组和PI3K抑制剂干预组与矽肺模型比较,大鼠肺组织内层粘连蛋白含量降低（P<0.05）。9.经方差分析,给药56天后,实验各组大鼠肺组织内MMP1含量比较差异有统计学意义（F=11.491,P<0.05）,矽肺模型组与生理盐水组比较,大鼠肺组织内MMP1含量升高（P<0.05）,去整合素干预组和PI3K抑制剂干预组与矽肺模型组比较,大鼠肺组织内MMP1含量均升高（P<0.05）;实验各组大鼠肺组织内MMP3含量比较差异有统计学意义（F=8.547,P<0.05）,矽肺模型组与生理盐水组比较,大鼠肺组织内MMP3含量均升高（P<0.05）,去整合素干预组和PI3K抑制剂干预组与矽肺模型组比较,大鼠肺组织内MMP3含量均升高（P<0.05）。结论1.Echistatin/BYL-719干预对大鼠矽肺细胞外基质有降解作用;2.Echistatin/BYL-719干预可影响MMP1和MMP3对细胞外基质的调控;3.Echistatin/BYL-719干预可减轻肺纤维化程度。
鲍金[6]（2020）在《OPN对低氧诱导的SD大鼠肺动脉平滑肌细胞自噬及细胞增殖能力的影响》文中认为目的 观察低氧条件下SD大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）骨桥蛋白（OPN）及自噬相关蛋白Beclin1、LC3B的表达,探讨低氧对自噬的影响;并通过OPN过表达及低表达慢病毒研究OPN对PASMCs细胞自噬及细胞增殖力的调控作用。方法 细胞分为6组:常氧对照组（Normoxic）、低氧对照组（Hypoxia）、低氧+OPN干扰空病毒组（H+OPN EV）、低氧+OPN干扰慢病毒组（H+OPN sh RNA）、低氧+OPN过表达空病毒组（H+OPN OEV）、低氧+OPN过表达慢病毒组（H+OPN sho RNA）。各组分别用5-乙炔基-2’-脱氧尿苷（Ed U）阳性标记率法检测细胞增殖能力、流式细胞术分析细胞周期、Western Blot法检测OPN及自噬相关蛋白Beclin1、LC3B的表达,RT-PCR法检测自噬相关基因Beclin1、LC3B m RNA的表达。结果 经低氧干预后OPN和自噬相关蛋白Beclin1、LC3B的表达相较常氧组增高（p<0.05）,细胞增殖力增强（p<0.05）,促进细胞周期进入S期。低氧条件下慢病毒进行OPN RNA干扰后,与低氧对照组相比,低氧+OPN干扰慢病毒组,OPN蛋白表达量降低,Beclin1、LC3B蛋白表达量和m RNA都增高（p<0.05）,细胞增殖能力减弱（p<0.05）,细胞周期阻滞于G0/G1期;低氧条件下细胞经OPN过表达处理后,与低氧对照组比较,OPN过表达组OPN蛋白表达增高,自噬相关蛋白Beclin1、LC3B表达量降低（p<0.05）,自噬相关基因LC3B的m RNA表达增强（p<0.05）,Beclin1的m RNA未改变（p>0.05）;细胞增殖能力和细胞周期无变化（p>0.05）。结论 低氧可使PASMCs OPN表达量增加,细胞自噬力和细胞增殖力增强;且OPN可促进低氧条件下PASMCs细胞增殖并负向调控细胞自噬。
林荣杰[7]（2020）在《骨桥蛋白促心房纤维化机制及其临床预测价值》文中指出背景:心房颤动（房颤）是临床上最常见的心律失常,其最重要的组织学特征是心房纤维化。心房纤维化不仅可以减慢心房内电信号的传导速度,过度增生的心房成纤维细胞还可以与心房肌细胞耦联,造成心房内异常传导。大量的临床研究证实,心房纤维化会降低临床药物及导管消融术对房颤的治疗成功率。因此,解析心房纤维化的成因及其机制对于房颤的预防和治疗至关重要。目的:通过生物信息学方法筛选房颤的发生过程的关键基因,并通过体内和体外实验证实该基因在房颤和心房纤维化发生过程中的作用及其机制。方法:综合运用R软件、Origin软件、Cytoscape软件等生物信息学分析工具筛选与房颤密切相关的基因;利用H-E染色、Masson染色、免疫组织化学染色及免疫蛋白印迹方法验证生物信息学分析结果;通过免疫荧光、免疫蛋白印迹、实时定量PCR、细胞增殖实验、透射电子显微镜等方法探讨骨桥蛋白对心房纤维化的作用及其机制;以ELISA方法检测健康人和房颤患者的外周血骨桥蛋白浓度;通过Penta Ray高精密度标测导管和Carto 3三维电解剖标测系统测定房颤患者的左心房电压。结果:生物信息学分析提示骨桥蛋白与房颤密切相关;免疫组织化学分析及免疫蛋白印迹证实房颤患者左心耳的骨桥蛋白的表达显着增加;骨桥蛋白显着促进人心房成纤维细胞的增殖和纤维化相关蛋白（CollagenⅠ及Fibronectin）的表达;抑制Akt/GSK-3β/β-catenin可以逆转骨桥蛋白对人心房成纤维细胞表型的影响;骨桥蛋白通过改变人心房成纤维细胞的自噬水平调控纤维化相关蛋白（CollagenⅠ及Fibronectin）的表达;房颤患者外周血骨桥蛋白浓度显着高于健康人;房颤患者外周血骨桥蛋白可以有效预测其心房纤维化程度。结论:骨桥蛋白通过激活Akt/GSK-3β/β-catenin通路和抑制自噬促进心房纤维化的形成。骨桥蛋白有可能成为心房纤维化的预测因素及改善房颤治疗效果的潜在靶点。
欧阳晓平[8]（2019）在《骨桥蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义》文中认为目的本研究通过RNA干扰技术靶向干预OPN基因,观察OPN基因下调后非小细胞肺癌细胞株A549、SK-MES-1和OPN基因过表达后非小细胞肺癌细胞株H1703的生物学行为变化,并探讨其相关机制,为非小细胞肺癌的临床治疗提供实验基础。方法通过免疫组化、实时荧光定量PCR方法对28例Ⅰ/Ⅱ期NSCLC及73例Ⅲ/Ⅳ期NSCLC组织中的OPN的表达进行检测,分析OPN表达与临床病理参数的相关性。Western blotting检测OPN在肺癌细胞株A549、SK-MES-1、H1703和永生化人支气管上皮细胞16HBE中的表达,通过RNA干扰技术下调A549及SK-MES-1细胞株的OPN表达,对H1703细胞株的OPN进行过表达,采用MTT 比色法、Transwell侵袭试验检测各细胞系对顺铂的敏感性及侵袭能力,通过Western blotting方法检测RNA干扰后A549、SK-MES-1细胞系LDHA的表达水平,并观察乳酸水平对A549、SK-MES-1细胞系顺铂敏感性的影响。结果1、OPN在肺癌组织中的表达明显高于正常组织,并与NSCLC的转移状态、分化程度及对顺铂的敏感性相关。而OPN的表达水平与年龄、性别、病理类型及吸烟史无明显相关性,差异比较无统计学意义。2、与永生化人支气管上皮细胞16HBE 比较,Western bloting检查显示OPN在A549、SK-MES-1及H1703细胞系中表达明显增高;成功构建了 OPN RNAi慢病毒载体,Western blotting检测显示其明显抑制A549、SK-MES-1细胞系的OPN蛋白表达水平,明显增强H1703细胞系的OPN表达水平。3、MTT 比色法分析显示OPN基因下调后,A549、SK-MES-1细胞系的增殖性降低,对顺铂的敏感性增加;OPN基因上调后H1703细胞系的增殖性增加,对顺铂的敏感性降低;Transwell实验显示OPN下调后能抑制A549、SK-MES-1细胞系的迁移及侵袭能力;4、OPN的mRNA及蛋白表达水平与LDHA呈明显相关性,乳酸增加导致A549、SK-MES-1细胞系对顺铂的敏感性降低。结论1、OPN在非小细胞肺癌组织中的表达明显增高,并与非小细胞肺癌的转移状态、分化程度及对顺铂的敏感性相关。2、OPN基因过表达能有效的增强H1703细胞系的增殖性并降低其对顺铂的敏感性;OPN基因下调能有效的抑制A549、SK-MES-1细胞系的迁移及侵袭能力,增加其对顺铂的敏感性。3、OPN表达水平与LDHA呈明显相关性,OPN可通过对LDHA的调控影响A549、SK-MES-1细胞系对顺铂的敏感性。
仲林[9]（2017）在《骨桥蛋白与膜联蛋白A2在浆液性卵巢癌中的表达及其相关性》文中研究指明目的:在妇科疾病中,卵巢癌是较为常见的一类恶性肿瘤类型,也是目前对女性身体健康威胁程度极大的疾病。目前卵巢恶性肿瘤中,最多见的一类就是卵巢上皮性癌。由于卵巢癌的特点,患者在发病初期症状非常不明晰,甚至不会有任何症状,因此患者在发病早期难以诊断,极易出现肿瘤转移以及广泛性种植。因此,这类患者的5年生存率非常低,有研究显示最高仅有3成。尤其是当前对卵巢癌的研究虽然时间较长,但卵巢癌的发病机制却仍然很不明确,这可能和很多因素导致的基因表达水平变化有较大关系。对于膜联蛋白A2而言,是近些年来发现的一种和肿瘤的转移有关的物质,在一些研究中显示,膜联蛋白A2在很多的恶性肿瘤病灶中会出现缺失或是表达降低的情况,这种情况很有可能和肿瘤的转移以及进展有着较大关系。而骨桥蛋白是磷酸化糖蛋白的类型,含有唾液酸,也是非常重要的细胞外基质类型。有研究显示,骨桥蛋白可以促进肿瘤的转移和生长,但骨桥蛋白的具体起效机制仍然并不清晰。近些年来的研究显示骨桥蛋白对很多恶性肿瘤疾病的诊断、监测以及预后分析均有很好的效果。但骨桥蛋白和膜联蛋白A2对卵巢癌,尤其是对浆液性卵巢癌的关系研究并不深入。在本次研究中,我们使用免疫组化染色法等诸多研究方法,分析了骨桥蛋白和膜联蛋白A2在浆液性卵巢癌患者体内的表达及其临床意义。方法:将我院收治的43例浆液性卵巢癌患者设置为观察组,将同期收治的另24例卵巢良性肿瘤患者设置为对照组,使用免疫组织化学法对43例浆液性卵巢癌患者的病灶组织以及24例卵巢良性肿瘤患者的病灶组织中膜联蛋白A2以及骨桥蛋白的表达情况,并进一步的分析膜联蛋白A2以及骨桥蛋白在浆液性卵巢癌患者疾病发生发展过程中的相关意义。结果:1.膜联蛋白A2在观察组患者病灶组织中的阳性率为39.53%,在对照组患者病灶组织中的阳性率为75%。通过对其实施统计学分析后显示,对照组患者的膜联蛋白A2表达阳性率明显高于对照组（X2=7.765,P=0.005,P<0.01）。另膜联蛋白A2在浆液性卵巢癌患者病灶组织中,若患者出现了淋巴结转移,其表达阳性率明显低于未出现淋巴结转移的患者,差异有统计学意义（X2=4.036,P=0.045,P<0.05）.在临床分期上,早期即Ⅰ期和Ⅱ期的浆液性卵巢癌患者体内的膜联蛋白A2表达阳性率明显高于晚期即ⅡⅠ期和ⅠV期浆液性卵巢癌患者表达阳性率,差异有统计学意义（X2=6.029,P=0.014,P<0.05）。而不同年龄的患者以及不同病理类型的患者中,其病灶组织的膜联蛋白A2表达阳性率差异无统计学意义（P>0.05）。2.通过使用免疫组化法检测完成后显示,观察组患者病灶组织中骨桥蛋白阳性率为72.42%,对照组患者病灶组织中的阳性率为37.5%。对其实施统计学分析后显示,观察组患者病灶组织骨桥蛋白表达阳性率明显低于对照组患者,差异有统计学意义（X2=8.841,P=0.003,P<0.01）。而在观察组患者中,出现了淋巴结转移的患者病灶组织中的骨桥蛋白表达阳性率明显高于未出现淋巴结转移患者,差异有统计学意义（X2=11.692,P=0.001,P<0.01）。在临床分期上,早期即Ⅰ期和Ⅱ期的浆液性卵巢癌患者体内的骨桥蛋白表达阳性率明显低于晚期即ⅡⅠ期和ⅠV期浆液性卵巢癌患者表达阳性率,差异有统计学意义（X2=12.029,P=0.001,P<0.01）。而不同年龄的患者以及不同病理类型的患者中,其病灶组织的骨桥蛋白表达阳性率差异无统计学意义（P>0.05）。。3.通过使用相关性分析后,显示本次研究中膜联蛋白A2和骨桥蛋白在病灶组织中的表达呈现出负相关（F=0.507,P=0.001,P<0.01）。结论:对于膜联蛋白A2而言,在卵巢卵巢良性肿瘤患者的病灶组织中呈现出高表达,并且其表达情况明显高于浆液性卵巢癌患者病灶组织中的阳性率,差异有统计学意义。这一结果说明,膜联蛋白A2有着抑制肿瘤发生发展以及转移和侵袭的效果。而骨桥蛋白在浆液性卵巢癌患者病灶组织中有着高表达的特点,并且其表达阳性率明显的高于卵巢良性肿瘤患者病灶组织。这说明骨桥蛋白会参与到浆液性卵巢癌患者的发生发展以及转移的过程。而在不同的浆液性卵巢癌患者的而分期中,早期患者的病灶组织中的膜联蛋白A2阳性率会明显的高于晚期患者病灶组织,这说明膜联蛋白A2和浆液性卵巢癌患者的临床分期以及疾病的淋巴结转移有着非常显着的关系。同时,在不同年龄以及不同病理类型的浆液性卵巢癌患者体内,膜联蛋白A2的阳性率情况差异并不明显,这说明膜联蛋白A2和患者的年龄以及肿瘤类型差异并没有较大的关系。对于骨桥蛋白而言,在浆液性卵巢癌患者病灶组织中的表达方面,早期患者明显低于晚期患者,差异有统计学意义。这说明骨桥蛋白会参与到浆液性卵巢癌的发生发展过程中,同时骨桥蛋白和浆液性卵巢癌患者的临床分期以及淋巴结转移有着较为紧密的联系,说明骨桥蛋白会参与到浆液性卵巢癌的转移以及侵袭过程中。在不同年龄以及不同病理类型的患者中,骨桥蛋白的差异并不明显,这说明骨桥蛋白和浆液性卵巢癌患者的年龄以及病理类型无显着差异。膜联蛋白A2和骨桥蛋白两者之间呈现负相关,这说明两者之间在浆液性卵巢癌的发生发展中存在有相反关系。
曹冲[10]（2017）在《牙龈素对动脉粥样硬化血管平滑肌细胞的作用及增殖调控研究》文中进行了进一步梳理目的:通过研究牙龈卟啉单胞菌提取的牙龈素对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖凋亡及炎症因子表达的影响,探讨牙龈素在大鼠主动脉平滑肌细胞增殖中的作用及其机制,为慢性牙周炎与动脉粥样硬化的相关性研究提供理论依据。方法:第一部分:运用丙酮有机沉淀、透析及差速离心法自牙龈卟啉单胞菌W83菌株中分离提取牙龈素混合物,检测其酶活性,测定蛋白浓度;原代培养大鼠主动脉平滑肌细胞,分别以100μg/ml,50μg/ml,25μg/ml,12μg/ml,6μg/ml,3μg/ml,1μg/ml,0μg/ml激活牙龈素干预48小时,CCK-8法检测细胞增殖。确定最佳牙龈素作用浓度后,以5μM、10μM、20μM、40μM精氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（Rgp）抑制剂（KYT-1）,赖氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（Kgp）抑制剂（KYT-36）抑制牙龈素酶活后干预大鼠主动脉平滑肌细胞,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期;免疫组化检测平滑肌细胞收缩型标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白及合成型标志蛋白骨桥蛋白;凋亡试剂盒检测大鼠主动脉平滑肌细胞凋亡情况;ELISA检测大鼠主动脉平滑肌细胞IL-8及TNF-α表达水平,并比较Rgp与Kgp作用差异。第二部分:设计骨桥蛋白siRNA序列,构建骨桥蛋白过表达质粒,转染至大鼠主动脉平滑肌细胞,确定转染效率。流式细胞仪检测细胞周期,realtime PCR检测增殖核抗原mRNA水平、α-平滑肌肌动蛋白及调宁蛋白mRNA水平,Westernblot检测α-平滑肌肌动蛋白及调宁蛋白蛋白水平。第三部分:表达谱基因芯片初筛牙龈素干预大鼠主动脉平滑肌细胞差异表达基因,realtime PCR验证。结果:第一部分:1)成功自牙龈卟啉单胞菌W83菌株中提取分离牙龈素,其Rgp酶活性为280U/L,Kgp酶活性为84U/L;2)牙龈素干预后,大鼠主动脉平滑肌细胞发生增殖,以牙龈素浓度为12μg/ml时增殖最显着（F=42.048,P<0.001）,10μM KYT1、KYT36及KYT1+KYT36抑制牙龈素酶活后,大鼠主动脉平滑肌细胞增殖明显降低,抑制其促增殖作用（F=12.109,P<0.001）,但各抑制剂之间差异无统计学意义（P>0.05）;3)牙龈素影响大鼠主动脉平滑肌细胞细胞周期,G0/G1期细胞数明显减少（25.87±4.58）,S期细胞数明显增加（49.90±3.63）,促进其由G0/G1期进入S期（P<0.001）;4)牙龈素干预后,大鼠主动脉平滑肌细胞骨桥蛋白表达明显增加,发生了表型转化;5)牙龈素干预后,大鼠主动脉平滑肌细胞凋亡率未显着增加,差异无统计学意义（P>0.05）;6)牙龈素干预48h后,炎症因子IL-8、TNF-α表达显着增加（IL-8:F=8.241,P=0.0014;TNF-α:F=44.14,P<0.001）。第二部分:1)成功构建骨桥蛋白-siRNA,50μM骨桥蛋白-siRNA F02 24h转染效率最高,转染后骨桥蛋白mRNA水平降低;2)成功构建骨桥蛋白过表达质粒,转染效率为60%,转染后骨桥蛋白mRNA水平显着增加;3)骨桥蛋白-siRNA转染后,大鼠主动脉平滑肌细胞细胞周期阻滞于G0/G1期,G0/G1期细胞数显着增加（55.43±1.50）,S期细胞数显着减少（26.87±3.52）,增殖核抗原mRNA表达显着降低（P<0.001）;骨桥蛋白过表达质粒转染后,大鼠主动脉平滑肌细胞细胞周期由G0/G1期进入S期,G0/G1期细胞数显着减少（38.90±2.67）,增殖核抗原mRNA表达显着增加（P<0.001）;4)骨桥蛋白-siRNA转染后,α-平滑肌肌动蛋白、调宁蛋白mRNA水平显着增加（P<0.001）;骨桥蛋白过表达质粒转染后,α-平滑肌肌动蛋白、调宁蛋白mRNA水平显着减少（P<0.001）。第三部分:表达谱芯片筛选出128个上调基因,42个下调基因;realtime PCR结果显示骨桥蛋白、αvβ3 mRNA水平显着增加。结论:1)牙龈素促进大鼠主动脉平滑肌细胞增殖,影响大鼠主动脉平滑肌细胞细胞周期,促使其由G0/G1期进入S期,Rgp与Kgp之间促增殖作用无明显差异;2)牙龈素促进大鼠主动脉平滑肌细胞发生细胞表型转变由收缩型转变为合成型,标志蛋白骨桥蛋白表达增加;2)牙龈素对大鼠主动脉平滑肌细胞凋亡的作用不明显;3)牙龈素促进大鼠主动脉平滑肌细胞表达IL-8与TNF-α,Rgp与Kgp之间作用无明显差异;4)骨桥蛋白通过调节α-平滑肌肌动蛋白及调宁蛋白影响大鼠主动脉平滑肌细胞细胞增殖;5)牙龈素通过骨桥蛋白-整合素-黏着斑激酶-细胞骨架蛋白途径调节大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖。
二、骨桥蛋白与细胞免疫（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、骨桥蛋白与细胞免疫（论文提纲范文）
（1）基于网络分析的肾结石关键基因和信号通路的鉴定及其分子机制研究（论文提纲范文）
| 内容提要 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 选题背景及研究意义 |
| 1.1.1 选题背景 |
| 1.1.2 研究意义 |
| 1.2 研究思路与主要内容 |
| 1.3 研究创新点和尚待解决的问题 |
| 1.3.1 主要创新点 |
| 1.3.2 尚待解决的问题 |
| 第2章 国内外文献综述 |
| 2.1 肾结石疾病的概述 |
| 2.1.1 肾结石疾病的统计分析 |
| 2.1.2 肾结石疾病的遗传特征研究进展 |
| 2.1.3 肾结石形成发展的分子机制研究进展 |
| 2.2 肾结石多组学整合研究 |
| 2.2.1 肾结石基因组学研究进展 |
| 2.2.2 肾结石转录组学研究进展 |
| 2.2.3 肾结石蛋白质组学研究进展 |
| 2.3 内质网应激和CAV1-EGFR-AKT信号通路 |
| 2.3.1 内质网应激介导泛素化-蛋白酶体降解引起细胞凋亡 |
| 2.3.2 CAV1-EGFR-AKT信号通路对细胞凋亡的调控作用 |
| 第3章 肾结石蛋白质组学网络分析揭示内质网应激在肾结石发生中的作用 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与方法 |
| 3.2.1 数据来源 |
| 3.2.2 肾结石相关蛋白相互作用网络构建及关键蛋白的获取 |
| 3.2.3 肾结石相关核心蛋白聚类分析 |
| 3.3 实验结果与讨论 |
| 3.3.1 肾结石相关蛋白质数据集的构建 |
| 3.3.2 含有31个关键蛋白的340个肾结石相关蛋白参与直接相互作用网络 |
| 3.3.3 内质网应激是结晶——细胞相互作用中的关键生物学进程 |
| 3.4 讨论 |
| 第4章 草酸钙肾结石引起内质网应激导致晶体细胞黏着的分子机制研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.2.1 细胞实验材料 |
| 4.2.2 动物实验材料 |
| 4.3 试剂配制 |
| 4.3.1 细胞培养基的配制 |
| 4.3.2 细胞冻存液 |
| 4.3.3 PBS的配制 |
| 4.3.4 一水草酸钙母液及工作液的配制 |
| 4.3.5 0.75%乙二醇(Ethylene glycol,EG)的配制 |
| 4.4 实验方法 |
| 4.4.1 HK2细胞复苏、传代及冻存 |
| 4.4.2 HK2细胞计数 |
| 4.4.3 动物实验 |
| 4.4.4 总RNA提取及逆转录 |
| 4.4.5 半定量PCR反应 |
| 4.4.6 Western Blot检测蛋白表达量 |
| 4.4.7 TUNEL实验检测细胞凋亡 |
| 4.4.8 MMT实验检测细胞活力 |
| 4.4.9 原子吸收实验检测细胞表面钙离子残留浓度 |
| 4.4.10 统计学分析 |
| 4.5 实验结果与讨论 |
| 4.5.1 草酸钙刺激诱导HK2细胞发生内质网应激 |
| 4.5.2 草酸钙结晶通过三条信号通路激活内质网应激 |
| 4.5.3 草酸钙刺激通过激活内质网应激特异性Caspase蛋白Caspase12诱导细胞凋亡 |
| 4.5.4 内质网应激作用影响结晶——细胞黏着 |
| 4.5.5 结晶形成的大鼠肾组织发生内质网应激 |
| 4.6 讨论 |
| 第5章 肾结石基因组和转录组学联合分析揭示CAV1-EGFR-AKT信号通路的损伤促进肾结石形成 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料与方法 |
| 5.2.1 肾结石多组学数据的获取 |
| 5.2.2 肾结石多组学数据的处理 |
| 5.2.3 肾结石基因组学及转录组学相互作用网络构建及关键蛋白的获取 |
| 5.2.4 肾结石基因组学转录组学关键细胞信号转导通路的获取 |
| 5.2.5 肾结石基因组学和转录组学关键蛋白及关键细胞信号转导通路整合分析 |
| 5.3 实验结果与讨论 |
| 5.3.1 获得基因组水平肾结石相关基因 |
| 5.3.2 VSE显示肾结石相关SNP未富集到基因转录调控等功能区段 |
| 5.3.3 转录组水平肾结石相关差异基因的获取 |
| 5.3.4 基因组水平肾结石网络分析 |
| 5.3.5 转录组水平肾结石网络分析 |
| 5.3.6 基因组水平肾结石风险基因的核心蛋白KEGG pathway分析 |
| 5.3.7 转录组水平肾结石差异基因的核心蛋白KEGG pathway分析 |
| 5.3.8 基因组、转录组肾结石网络整合分析 |
| 5.4 讨论 |
| 第6章 草酸钙肾结石通过CAV1-EGFR-AKT信号通路诱导细胞凋亡促进肾结石形成的分子机制研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 实验材料 |
| 6.2.1 细胞实验材料 |
| 6.2.2 动物实验材料 |
| 6.3 试剂配制 |
| 6.3.1 细胞培养基、冻存液及PBS等的配制 |
| 6.3.2 台盼蓝溶液配制 |
| 6.3.3 MG132的配制 |
| 6.4 实验方法 |
| 6.4.1 HK2细胞复苏、传代及冻存 |
| 6.4.2 HK2细胞计数 |
| 6.4.3 台盼蓝染色 |
| 6.4.4 TUNEL实验检测细胞凋亡 |
| 6.4.5 细胞免疫荧光检测蛋白表达 |
| 6.4.6 总RNA提取及逆转录 |
| 6.4.7 实时定量荧光PCR反应(RT-PCR) |
| 6.4.8 Western blot检测蛋白表达量 |
| 6.4.9 CAV1腺病毒过表达 |
| 6.4.10 原子吸收实验检测钙离子浓度 |
| 6.4.11 动物实验 |
| 6.4.12 统计学分析 |
| 6.5 实验结果与讨论 |
| 6.5.1 草酸钙刺激导致HK2细胞凋亡 |
| 6.5.2 草酸钙刺激后HK2细胞CAV1-EGFR-AKT生存信号通路受损 |
| 6.5.3 过表达CAV1 逆转细胞凋亡并降低结晶——细胞黏着 |
| 6.5.4 结晶形成的大鼠肾组织CAV1-EGFR-AKT信号通路受损 |
| 6.5.5 草酸钙刺激导致内质网应激引起泛素-蛋白酶体降解CAV1,EGFR |
| 6.5.6 结晶形成的大鼠肾组织炎症发生 |
| 6.6 讨论 |
| 第7章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1 肾结石相关蛋白质数据集 |
| 附录2 SNP映射基因表 |
| 附录3 肾结石Microarray N&C组上调差异基因表 |
| 附录4 肾结石Microarray N&C组下调差异基因表 |
| 附录5 肾结石Microarray P&C组上调差异基因表 |
| 附录6 肾结石Microarray P&C组下调差异基因表 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及取得的科研成果 |
| 致谢 |
（2）动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者血浆骨桥蛋白水平与临床预后的相关性分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 资料收集 |
| 2 实验研究方法 |
| 3 实验分组 |
| 4 诊断标准 |
| 4.1 纳入标准 |
| 4.2 排除标准 |
| 5 治疗方法 |
| 6 相关评估量表 |
| 6.1 病情评估 |
| 6.2 预后评估 |
| 7 OPN实验检测 |
| 7.1 主要仪器及试剂 |
| 7.2 标本采集 |
| 7.3 实验原理 |
| 7.4 实验步骤 |
| 8 统计学方法 |
| 结果 |
| 1.试验组与对照组基本资料的比较 |
| 2.试验组不同时间血浆OPN值得变化趋势 |
| 3.血浆OPN水平升高的分析 |
| 4.试验组血浆OPN水平与临床疾病分级的相关性 |
| 5.影响a SAH患者预后不良的单因素分析 |
| 6.影响a SAH患者预后不良各因素的Logistic回归分析 |
| 7.血浆OPN水平与发病90 天预后不良的预测分析 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 文献综述 骨桥蛋白与临床相关疾病的研究进展 |
| 1 骨桥蛋白的结构 |
| 2 骨桥蛋白的亚型 |
| 3 骨桥蛋白的生物特性 |
| 4 骨桥蛋白的信号转导 |
| 5 骨桥蛋白的组织分布 |
| 6 骨桥蛋白的生物功能调节 |
| 7 骨桥蛋白相关的临床疾病 |
| 7.1 骨桥蛋白与炎症、伤口愈合 |
| 7.2 骨桥蛋白与生物矿化 |
| 7.3 骨桥蛋白与心血管疾病 |
| 7.4 骨桥蛋白与神经疾病 |
| 7.5 骨桥蛋白与癌症 |
| 8 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在校期间的研究成果 |
（4）长链非编码RNA MALAT1通过吸附miR-127-5p调控骨桥蛋白在草酸钠结晶肾损伤中的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第一部分 MALAT1在草酸钠结晶肾损伤过程中的生物学功能研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 MALAT1调控草酸钠结晶肾损伤过程中的机制研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 附录 |
| 文献综述 长链非编码 RNA 在肾脏纤维化中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表论文以及科研成果 |
| 致谢 |
（5）Echistatin/BYL-719干预细胞外基质在大鼠矽肺纤维化发生中的作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 细胞外基质在特发性肺纤维化中的作用 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（6）OPN对低氧诱导的SD大鼠肺动脉平滑肌细胞自噬及细胞增殖能力的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文对照表 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 主要试剂与材料 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.1.4 主要试剂配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 PASMCs的分离 |
| 2.2.2 PASMCs的传代 |
| 2.2.3 PASMCs的冻存 |
| 2.2.4 PASMCs的复苏 |
| 2.2.5 α-SMA免疫组化法鉴定PASMCs |
| 2.2.6 实验分组 |
| 2.2.7 EdU细胞增殖实验 |
| 2.2.8 细胞周期实验 |
| 2.2.9 PASMCs总 RNA提取 |
| 2.2.10 cDNA的合成 |
| 2.2.11 RT-PCR反应 |
| 2.2.12 PASMCs蛋白的提取 |
| 2.2.13 BCA检测蛋白浓度 |
| 2.2.14 蛋白印迹法实验 |
| 2.2.15 细胞转染 |
| 2.3 统计学处理 |
| 第3章 实验结果 |
| 3.1 PASMCs的鉴定 |
| 3.2 低氧对PASMCs细胞增殖的影响 |
| 3.2.1 EdU细胞增殖结果 |
| 3.2.2 细胞周期结果 |
| 3.3 低氧对PASMCs自噬m RNA表达的影响 |
| 3.4 低氧对PASMCs OPN和自噬蛋白表达的影响 |
| 3.5 低氧下调控OPN对 PASMCs细胞增殖的影响 |
| 3.5.1 EdU细胞增殖结果 |
| 3.5.2 细胞周期结果 |
| 3.6 低氧下调控OPN对 PASMCs自噬m RNA表达的影响 |
| 3.7 低氧下调控OPN对 PASMCs自噬蛋白表达的影响 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 创新之处 |
| 参考文献 |
| 综述 骨桥蛋白对肺动脉高压的作用及机制的研究 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）骨桥蛋白促心房纤维化机制及其临床预测价值（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 本文简缩词表(按英文字母顺序排列) |
| 绪论 |
| 第一部分 芯片数据获取及差异表达基因分析与验证 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 第二部分 骨桥蛋白通过激活Akt/GSK-3β/β-catenin通路及抑制自噬促进心房纤维化 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 第三部分 骨桥蛋白的临床预测价值 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 |
（8）骨桥蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 绪论 |
| 参考文献 |
| 第一部分 OPN在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义 |
| 材料与方法 |
| 1、病例资料及标本来源 |
| 2、实验设备 |
| 3、实验试剂 |
| 4、肺癌组织石蜡切片的制作 |
| 5、苏木精-伊红染色 |
| 6、免疫组织化学染色 |
| 7、肺癌组织RNA提取步骤 |
| 8、RNA反转录cDNA第一链的合成 |
| 9、qPCR操作步骤 |
| 10、统计学分析 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 RNA干扰OPN基因对人非小细胞肺癌A549、SK-MES-1及H1703细胞生物学行为的影响 |
| 材料与方法 |
| 1、实验材料 |
| 2、实验试剂 |
| 3、相关实验试剂的配置方法 |
| 4、实验细胞 |
| 5、细胞复苏 |
| 6、细胞传代 |
| 7、细胞冻存 |
| 8、siRNA的设计及慢病毒载体的构建 |
| 9、siRNA转染步骤 |
| 10、Western Blot方法检测细胞中OPN表达 |
| 11、MTT分析 |
| 12、Transwell侵袭实验 |
| 结果 |
| 1、RNA干扰前后A549、SK-MES-1、H1703细胞OPN表达水平的变化 |
| 2、RNAi干扰后对A549、SK-MES-1、H1703细胞增殖能力的影响 |
| 3、下调OPN对A549、SK-MES-1细胞侵袭能力的影响 |
| 4、RNAi后A549、SK-MES-1、H1703细胞对顺铂敏感性的变化 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三部分 OPN参与非小细胞肺癌细胞顺铂耐药的机制研究 |
| 材料和方法 |
| 1、实验材料 |
| 2、实验试剂 |
| 3、相关实验试剂的配置方法 |
| 4、实验细胞 |
| 5、细胞复苏 |
| 6、细胞传代 |
| 7、细胞冻存 |
| 8、siRNA细胞转染 |
| 9、乳酸测试盒测定细胞乳酸产生 |
| 10、MTT分析 |
| 11、Western Blot方法检测细胞中OPN表达 |
| 结果 |
| 1、数据库筛选 |
| 2、OPN下调后A549、SK-MES-1细胞中OPN与LDHA蛋白表达 |
| 3、OPN下调后A549、SK-MES-1细胞中乳酸生成 |
| 4、OPN下调后乳酸对A549、SK-MES-1细胞顺铂敏感性的影响 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读博士期间发表文章 |
| 英文缩略词表 |
| 致谢 |
（9）骨桥蛋白与膜联蛋白A2在浆液性卵巢癌中的表达及其相关性（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 资料与方法 |
| 1 一般资料 |
| 2 实验设备 |
| 3 实验方法 |
| 4 结果判定方法 |
| 5 统计学方法 |
| 结果 |
| 1 膜联蛋白A2及OPN在卵巢良性组织和卵巢癌中的表达 |
| 2 病理类型 |
| 3 临床分期 |
| 4 淋巴结转移 |
| 5 年龄 |
| 6 用spearman等级相关分析膜联蛋白A2和OPN二者之间表达的相关性 |
| 讨论 |
| 1 浆液性卵巢癌的概念 |
| 2 骨桥蛋白与膜联蛋白A2的生物学特性 |
| 3 骨桥蛋白和膜联蛋白A2与浆液性卵巢癌的相关性 |
| 4 骨桥蛋白与膜联蛋白A2对于浆液性卵巢癌的诊疗价值 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述述参考文献 |
| 攻读学位期间研究成果 |
| 致谢 |
（10）牙龈素对动脉粥样硬化血管平滑肌细胞的作用及增殖调控研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 牙龈素对血管平滑肌细胞的影响 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 试剂与仪器 |
| 1.3 实验方法和步骤 |
| 1.4 统计方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二部分 OPN在血管平滑肌细胞增殖中的作用 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 试剂与仪器 |
| 1.3 实验方法和步骤 |
| 1.4 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三部分 牙龈素干预血管平滑肌细胞前后的差异表达分析 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 试剂与仪器 |
| 1.3 实验方法与步骤 |
| 1.4 统计方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简历 |
| 新疆医科大学硕士研究生学位论文 导师评阅表 |
四、骨桥蛋白与细胞免疫（论文参考文献）
- [1]基于网络分析的肾结石关键基因和信号通路的鉴定及其分子机制研究[D]. 杨宝瑜. 辽宁大学, 2021(02)
- [2]动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者血浆骨桥蛋白水平与临床预后的相关性分析[D]. 王明明. 甘肃中医药大学, 2021(01)
- [3]血清OPN、SIL-2R、IL-2水平对活动性肺结核病情及预后判定的意义[J]. 刘坤,齐红双,李英,潘卫东. 中国实用医刊, 2021(04)
- [4]长链非编码RNA MALAT1通过吸附miR-127-5p调控骨桥蛋白在草酸钠结晶肾损伤中的机制研究[D]. 张杰. 中国人民解放军海军军医大学, 2020(05)
- [5]Echistatin/BYL-719干预细胞外基质在大鼠矽肺纤维化发生中的作用[D]. 司学哲. 新乡医学院, 2020(06)
- [6]OPN对低氧诱导的SD大鼠肺动脉平滑肌细胞自噬及细胞增殖能力的影响[D]. 鲍金. 青海大学, 2020(02)
- [7]骨桥蛋白促心房纤维化机制及其临床预测价值[D]. 林荣杰. 上海交通大学, 2020(01)
- [8]骨桥蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义[D]. 欧阳晓平. 苏州大学, 2019(04)
- [9]骨桥蛋白与膜联蛋白A2在浆液性卵巢癌中的表达及其相关性[D]. 仲林. 青岛大学, 2017(06)
- [10]牙龈素对动脉粥样硬化血管平滑肌细胞的作用及增殖调控研究[D]. 曹冲. 新疆医科大学, 2017(05)